镍柱原位清洁试剂盒

货号: N1524123
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级别和纯度: 无菌过滤 ? 除菌过滤 —— 经 0.2µm 过滤去除微生物。作为即用无菌溶液用于培养和敏感应用。 BioReagent ? 生物试剂级(BioReagent)—— 经测试适用于生命科学和分子生物学。适用于需要生物相容性的细胞培养、检测和生化工作。
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规格
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10T
N1524123-10T
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¥269.90
20T
N1524123-20T
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¥399.90
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为什么选择此级别

BioReagent,无菌过滤 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

室温。常规运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

是否无菌:是

镍柱介质是分离纯化His标记蛋白的重要材料,但反复使用后非常容易污染杂蛋白和杂质,是对His标记蛋白的回收率越来越低。为此本公司开发了镍柱原位清洁试剂盒,它具有下列特点: 

1. 即开即用,不用单独准备各种溶液。 

2. 原位清洁,直接在亲和层析柱中进行清洁,免去繁琐的装柱步骤。   

3. 操作步骤简单,半小时即可完成。 

4. 清洁的效果好,极大恢复镍柱介质的活性。 

5. 可清除污染的离子型结合蛋白、沉淀蛋白、弱疏水性蛋白、脂蛋白、强疏水性蛋白和脂类。 

6. 适用于各种镍柱介质(包括Ni-NTA或Ni-IDA)。

7. 本产品仅供科研使用。


产品组分

N1524123组份物理外观10T20T储存单次测试使用量
N1524123A溶液A无色透明液体100 mL200 mL室温10 mL
N1524123B溶液B无色透明液体20 mL40 mL室温2 mL
N1524123C溶液C无色透明液体100 mL200 mL室温10 mL
N1524123D溶液D无色透明液体100 mL200 mL室温10 mL
注:每个Test推荐Ni填料使用量为1 mL。 

使用方法

如果镍柱介质污染了其他蛋白和杂质,需要按下列步骤清洗;如果镍柱介质对His标记蛋白结合降低(蓝色越来越淡),则需要另购镍柱原位再生试剂盒。 

1. 去除镍柱中的离子型结合蛋白:用10倍介质体积的溶液A洗涤镍柱(对 1 mL的镍柱介质需要用10 mL溶液A洗涤),再用10倍介质体积的自 备去离子水洗涤镍柱。处理后的镍柱介质根据需要可以直接使用,也可以保存在20%的乙醇溶液中于4℃长期保存,还可以继续下面的清洁步骤。 

2. 去除镍柱中的沉淀蛋白、弱疏水性蛋白和脂蛋白:封堵住层析介质的下端出口,然后加入2倍介质体积的溶液B,再盖上上端口,颠倒混匀后浸泡2小时,再用10倍介质体积的溶液C洗涤镍柱介质,最后用10倍介质体积的自备去离子水洗涤镍柱。处理后的镍柱介质根据需要可以直接使 用,也可以保存在20%的乙醇溶液中于4℃长期保存,还可以继续下面的清洁步骤。 

3. 去除镍柱中的强疏水性蛋白和脂类:封堵住层析介质的下端出口,然后加 入10倍介质体积的溶液D,再盖上上端口,颠倒混匀后浸泡20分钟, 再用10倍介质体积的自备去离子水洗涤镍柱。处理后的镍柱介质根据需要可以直接使用,也可以保存在20%的乙醇溶液中于4℃长期保存。

Nickel affinity resin is essential for purification of His-tagged recombinant proteins. However, repeated usage inevitably causes accumulation of miscellaneous proteins and contaminants, resulting in continuous decline of target protein recovery. To address this issue, we developed the In-situ Nickel Column Cleaning Kit with the following features:

1. Ready-to-use formulation; no extra buffer preparation required.

2. In-column cleaning: all treatments are performed directly in the affinity chromatography column without tedious resin repacking.

3. Straightforward procedures; the whole cleaning process can be finished within 30 minutes.

4. Excellent cleaning performance to effectively restore the binding activity of nickel resin.

5. Capable of removing ionic-bound proteins, precipitated proteins, weakly hydrophobic proteins, strongly hydrophobic proteins, lipoproteins and lipids.

6. Compatible with all types of nickel-charged resins including Ni-NTA and Ni-IDA.

7. For research use only.

Components

N15058034ComponentsAppearance10T20TStorageQuantity Per Test
N15058034ASolution AColorless liquid 100 mL200 mLRoom Temperature10 mL
N15058034BSolution BColorless liquid 20 mL40 mLRoom Temperature2 mL
N15058034CSolution CColorless liquid 100 mL200 mLRoom Temperature10 mL
N15058034DSolution DColorless liquid 100 mL200 mLRoom Temperature10 mL
Note: The recommended amount of Ni resin for each test is 1 mL.

Instruction for use 

Proceed with the following cleaning steps if the nickel resin is contaminated by foreign proteins and impurities. Purchase the separate In-situ Nickel Column Regeneration Kit when the resin shows reduced binding toward His-tagged proteins accompanied by obvious fading of light-blue color.

1. Removal of ionically bound proteins: Wash the column with Solution A at 10 bed volumes (10 mL Solution A for 1 mL resin), then rinse with 10 bed volumes of user-provided deionized water. The treated resin can be used directly, stored long-term in 20% ethanol at 4 ℃, or subjected to subsequent cleaning steps as needed.

2. Removal of precipitated proteins, weakly hydrophobic proteins and lipoproteins: Seal the column bottom outlet, add Solution B at 2 bed volumes and cap the top inlet. Invert to mix thoroughly and incubate for 2 hours. Afterwards wash sequentially with 10 bed volumes of Solution C and 10 bed volumes of user-provided deionized water. The treated resin is available for immediate use, long-term storage in 20% ethanol at 4 ℃ or further cleaning.

3. Removal of strongly hydrophobic proteins and lipids: Block the column bottom outlet, add Solution D at 10 bed volumes and seal the top inlet. Invert for mixing and soak for 20 minutes, then rinse with 10 bed volumes of user-provided deionized water. The treated resin can either be used directly or preserved long-term in 20% ethanol at 4 ℃.

规格

别名
镍柱在位清洁试剂盒 | 镍琼脂糖层析柱清洁试剂盒
英文别名
Ni-Agarose Column in situ Cleaning Kit | Ni Column In-Place Cleaning Kit
规格或纯度
BioReagent, 无菌过滤
英文名称
Ni-Agarose Column In-Place Cleaning Kit
应用
Purification
储存与运输
储存条件
室温
运输条件
常规运输
稳定性与储存
各组分在相应的储存条件下保质期一年。
组分与储存
N1524123
组份物理外观10T20T储存单次测试使用量
N1524123A
溶液A无色透明液体 100 mL200 mL室温10 mL
N1524123B
溶液B无色透明液体 20 mL40 mL室温2 mL
N1524123C
溶液C无色透明液体 100 mL200 mL室温10 mL
N1524123D
溶液D无色透明液体 100 mL200 mL室温10 mL
Note: The recommended amount of Ni resin for each test is 1 mL.

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

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📊 产品数据表

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🔬 规格说明书

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