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蛋白纯化

用于检测、定量和定位抗原与抗体的技术——ELISA、免疫印迹、免疫组化与流式细胞术。以下是我们知识库中标注该主题的实验方案、常见问题与技术文章。

8 项资源 · 实验方案、常见问题与文章
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亲和层析介质的类型与选择

亲和层析介质通过固定化配基与目标分子的特异性或高选择性相互作用实现分离。His标签蛋白可利用Ni²⁺或Co²⁺金属螯合介质捕获,GST、MBP和Strep标签分别对应谷胱甘肽、糊精和Strep类配基;硼酸介质可识别含顺式二醇结构的分子,硫酸化介质可用于部分蛋白和病毒颗粒的富集,CNBr活化介质则用于自定义配基偶联。 ...

更新于 2026年9月阅读12分钟
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蛋白纯化中的分离介质选择:凝胶填料与磁珠的原理与应用

蛋白纯化流程中,层析填料与磁珠是实现“选择性结合—洗脱”的核心分离介质。不同基质(琼脂糖、葡聚糖、合成聚合物等)及不同功能化方式(离子交换、亲和、疏水、分子筛等),决定了介质在载量、分辨率、耐压性与生物相容性等方面的性能差异。与此同时,以Fe₃O₄/Fe₂O₃为磁性核心、外包覆多种基质和活性基团的功能化磁珠,进一步在小体积、高通量和自动化场景下拓展了蛋白纯化手段。本文围绕凝胶填料与磁珠的结构特点、分类方式及与纯化阶段的匹配关系,对分离介质的选择与组合策略进行系统梳理,为蛋白纯化工艺设计提供参考。 ...

更新于 2025年12月阅读12分钟
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防止蛋白沉淀的缓冲液添加剂

在蛋白纯化过程中,目标分子一旦脱离胞内天然微环境,极易发生疏水暴露与错误折叠,进而沉淀、变性并造成活性丧失与得率下降。为降低上述风险,可在纯化缓冲液中加入具保护作用的组分,通过模拟细胞内渗透与离子环境、屏蔽疏水相互作用、稳定天然构象与中间体等多重机制,提升蛋白的折叠稳定性与溶解性,从而保障纯化流程的可控性与产质量。 ...

更新于 2025年11月阅读12分钟
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常用的四种沉淀蛋白的方法

沉淀法是蛋白纯化初期的经典技术,优势为设备简单、操作便捷、能浓缩样品并保收率,但纯度提升有限,仅用于初步纯化。以下是四种常用方法的核心要点:

更新于 2025年9月阅读12分钟

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