计算溶液所需的质量、体积或浓度。
BioReagent 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
2-8°C储存,禁止冷冻。低温运输,禁止冷冻 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
储存缓冲液:20% (v/v) Ethanol
UltraBio™ Heparin琼脂糖磁珠是将肝素定向偶联到琼脂糖磁珠上,能够纯化肝素依赖性生物分子的复合材料。搭配磁力架或者自动化设备,能够快速的从样本中分离纯化包括抗凝血酶、凝血因子和其它血浆蛋白、DNA结合蛋白、脂蛋白、蛋白合成因子、核酸作用酶和类固醇受体。
本产品每毫升磁珠悬液含约20%琼脂糖磁珠沉淀。
包装规格:20%(v/v)悬液
| 参数 | 指标 |
| 基质 | 琼脂糖 |
| 配基 | Heparin |
| 含量 | Slurry: 20% |
| 粒径 | 10-37 μm |
| 载量 | 2-3mg/mL Gel |
| 保存 | 2-8℃ (20% 乙醇) |
注:蛋白结合量与蛋白特性有关,具体需客户测试摸索,表中仅供参考。
使用说明:
一、缓冲液配方
| 缓冲液 | 配方 |
| Binding/Wash Buffer | 50mM Tris-HCl, pH 8.0 |
| Elution Buffer | 50mM Tris-HCl, 1-2M NaCl, pH 8.0 |
| Neutrilization Buffer | 1 M Tris-HCl, pH 9.0 |
| Storage Buffer | 20% Ethanol or PBST, 0.05% ProClin 300 |
二、操作步骤(以纯化人血浆为例)
1、样品处理
取人血浆1mL至2mL离心管中,加入500µL Binding Buffer,涡旋混匀。
2、磁珠预处理
(1) 充分混匀磁珠后,取500µL磁珠悬液(即纯磁珠100µL)到新的1.5mL离心管中,磁性分离,弃上清;
(2) 加入1mL Binding Buffer于离心管中,涡旋15s,磁性分离,弃上清;该步骤重复一次。
3、蛋白结合
在处理好的磁珠管中加入步骤1处理的样品溶液,涡旋15s,在室温下置于翻转混合仪结合30min,然后进行磁性分离,弃上清。
4、清洗磁珠
加入1mL的Washing Buffer于离心管中,涡旋混合30s,磁性分离,弃上清;再重复该步骤2次。(可在 Washing Buffer中加入10-100mM终浓度的NaCl,能有效的去除非特异性吸附蛋白,从而获得纯度更高的目标蛋白。)
5、蛋白洗脱
向上述加入0.2mL Elution Buffer,涡旋1s,然后室温下置于翻转混合仪10min,置于磁力架上进行磁性分离,收集洗脱液到新的离心管中,即为纯化的目标蛋白。
6、磁珠清洗
(1) 用1mL纯化水洗涤磁珠3次;
(2) 用Binding Buffer洗涤磁珠3次。
7、磁珠再生
磁珠多次使用后会有非特异性蛋白吸附于磁珠上,建议进行再生操作。
再生操作为:分别用0.1M NaOH、8M尿素洗涤磁珠10min,然后依次用纯化水、50mM Tris-HCl,(pH 8.0)洗涤2次,最后保存于20%乙醇中,于2-8℃保存。
注意事项:
1、磁珠每次取用前,都需要涡旋混匀,确保磁珠悬液处于均一状态。
2、磁珠使用后于保存液中储存2-8℃,避免冷冻或离心。
3、样本的盐浓度和pH会影响目标蛋白的结合和洗脱,最佳的实验条件需要客户自行摸索。
通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA,每批产品都进行了严格的验证,您可放心使用!
| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
| 分析证书 | S1375270 | |
| 分析证书 | S1375270 | |
| 分析证书 | S1375270 |