T7核酸内切酶I

Name: T7核酸内切酶I
SKU: T750878
Availability: InStock

货号: T750878

COA

有货

级别和纯度: 无动物源 ? 无载体 ? 生物活性 ? ActiBioPure™ ? EnzymoPure™ ? 无RNA酶 ? 无菌 ? ≥95%(SDS-PAGE) 10 U/µL

Accession #

P00641.1

表达系统

E. coli

生物活性

One unit is defined as the amount of enzyme required to convert > 90% of 1μg of supercoiled cruciform pUC(AT) to > 90% linear form in a total reaction volume of 50 μl in 1 hour at 37℃.

规格

库存

价格

数量

250U

T750878-250U

期货

¥499.90

1250U

T750878-1250U

期货

¥1,799.90

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概述规格储存与运输技术文档高级数据质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱) 技术文档和文章溶液计算器常见问题

🧪

为什么选择此级别

ActiBioPure™,EnzymoPure™,无RNA酶,无动物源,无菌,无载体,生物活性级提供 ≥95%(SDS-PAGE) 纯度，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

🌡

储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输。请查阅批次 COA 获取详细规格。

📋

质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

📚

文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

T7 Endonuclease I (T7 Endo I, T7EI)，中文名称 T7 核酸内切酶 I，可识别并切割不完全配对 DNA、十字型结构 DNA、Holliday 结构或 DNA 分叉点、异源双链 DNA，切割位点位于错配位点 5' 端的第一个、第二或第三个磷酸二酯键。此外 T7EI 也能以很慢的速度切割含有缺刻的双链 DNA。值得注意的是，T7EI 可以识别长度大于或等于 2 个碱基对 (bp) 的插入、缺失或突变导致的 DNA 错配，但不能识别的 DNA 错配，对 C 错配的切割效果最佳。

本品为克隆重组 T7 Endonuclease I 基因后在大肠杆菌中表达纯化获得的高纯度蛋白，不含其他内切酶或外切酶污染。

产品应用

①基因突变、SNP、TALEN 或 CRISPR/Cas9 形成的突变体检测。

②检测或切割异源双链 DNA 和切刻的 DNA。

③随机切割线性 DNA 进行鸟枪法克隆。

质量控制

① 蛋白纯度

经 SDS-PAGE 凝胶电泳检测，蛋白纯度不低于 95%。

② 非特异性内切酶活性

在 20 μl 反应体系中将 10 U T7 Endonuclease I 与 200 ng 的质粒 DNA 在 37℃共同温育 2 h 后，使用琼脂糖凝胶电泳检测，少于20% 超螺旋质粒 DNA 转变成缺刻或线性状态。

③ DNase 活性

在 20 μl 反应体系中将 10 U T7 Endonuclease I 与 15 ng 的双链DNA 片段在 37℃共同温育 2 h 后，使用琼脂糖凝胶电泳检测，双链DNA 片段无变化。

组分与储存

组分货号	组分名称	物理外观	250U	1250U	储存
T750878A	T7核酸内切酶I (10U/µl)	液体	25μL	125μL	-20℃.
T750878B	10×反应缓冲液	液体	1.25ml	1.25ml	-20℃.
T750878C	Control template (100ng/µl)	液体	20μL	20μL	-20℃.

使用方法

1. 配制退火反应体系

试剂	实验组	阴性对照 1	阴性对照 2	阳性对照
PCR产物 (Wild Type)	200 ng	200 ng	/	/
PCR产物 (Mutant)	200 ng	/	200 ng	/
Control Template (T7EI)①	/	/	/	2 μl
10×反应缓冲液	2 μl	2 μl	2 μl	2 μl
Nuclease-free water	To 19 μl	To 19 μl	To 19 μl	To 19 μl

注：①Control Template 为突变型和野生型 PCR 产物 1:1（各 100 ng）的混合物，使用前需退火成含不配对的杂合链。退火后经 T7EI 酶切产生 620 bp 和 175 bp 条带。

2.使用 PCR 仪退火

温度	时间
95℃	5 min
95~85℃	-2℃ /s
85~25℃	-0.1℃ /s
4℃	∞

3. T7 Endonuclease I 酶切

试剂	加入量
“步骤 1”的退火反应产物	19 μl
T7核酸内切酶I	1 μl

注：

① 37℃反应 15~30 min；

② 85℃加热 15 min 或加入 1.5 μl 的 0.25 M EDTA 终止酶切反应。

4. 将酶切产物使用 2% 的琼脂糖凝胶进行电泳检测

注意事项

1.T7核酸内切酶I具有底物结构选择性，以不同的活性作用于不同的 DNA 底物。切割特定底物时必须控制酶量和反应时间以达到最佳酶切效果。

2.反应温度超过 42℃ 时会使 T7 Endonuclease I 非特异性核酸酶活性增强，超过 55s℃会导致酶活下降。

3.Mn²⁺ 会显著增加T7核酸内切酶I非特异性核酸酶活性，请使用不含Mn²⁺ 的 PCR Buffer 进行 PCR 扩增。

4.T7核酸内切酶I可兼容多种 PCR Buffer，PCR 产物可不经过纯化直接用于酶切检测，若酶切结果异常，可以将 PCR 产物纯化后再进行实验。

规格

产品名称

T7核酸内切酶I

别名

T7核酸内切酶I

英文别名

T7 Endo I | T7EI | T7p19

规格或纯度

无动物源, 无载体, 生物活性, ActiBioPure™, EnzymoPure™, 无RNA酶, 无菌, ≥95%(SDS-PAGE), 10 U/µL

生物活性

One unit is defined as the amount of enzyme required to convert > 90% of 1μg of supercoiled cruciform pUC(AT) to > 90% linear form in a total reaction volume of 50 μl in 1 hour at 37℃.

表达系统

E. coli

种属

Escherichia phage T7

无载体

Yes

无动物源

Yes

来源

重组表达

分子类型

酶

产品线

biological_products

储存与运输

物理形态

液体

储存缓冲液

20 mM Tris-HCl, 200 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA 50% Glycerol, 0.15% Triton X-100, pH 7.5

浓度

10 U/µL

储存条件

-20°C储存,避免反复冻融

运输条件

超低温运输

稳定性与储存

长期储存-20℃（24个月）；避免反复冻融。

单位定义

One unit is defined as the amount of enzyme required to convert ＞ 90% of 1 μg of supercoiled cruciform pUC(AT) to ＞ 90% linear form in a total reaction volume of 50 μl in 1 hour at 37℃。10X Reaction Buffer:500 mM NaCl, 100 mM Tris-HCl, 100 mM MgCl2, 10 mM

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

全面的危险、操作、储存及法规合规文件。

下载 SDS →

✅ 分析证书 (COA)

批次质量数据。输入批号以获取对应 COA。

查询 COA →

📊 产品数据表

产品规格和应用的快速参考摘要。

查看数据表 →

🔬 规格说明书

该级别的完整质量属性和验收标准。

查看规格说明 →

高级数据

质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):

输入批号以搜索分析图谱:

技术文档和文章

t750878_t7 endonuclease i 产品说明书.pdf

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溶液计算器

摩尔浓度计算器

计算溶液所需的质量、体积或浓度。

质量

浓度

体积

分子量

g/mol

稀释计算器

计算配制储备溶液所需的稀释度。

浓度1（C1）

体积 1 (V1)

浓度 2 (C2)

体积 2 (V2)

复溶计算器

复溶计算器允许您快速计算试剂的体积，以复溶小瓶。只需输入试剂的质量和目标浓度，计算器将确定其余部分。

体积（添加到小瓶中）

质量（小瓶）

所需的复溶浓度

常见问题

什么是「无动物源」？

「无动物源」表示该物料经过加工和检测，适用于特种工业加工。规格侧重于影响该应用性能的杂质——例如，电子应用的金属含量、电池应用的粒度、光学应用的折射率，或对水分敏感工艺的水分含量。

什么是「无载体」？

「无载体」表示该物料经过加工和检测，适用于特种工业加工。规格侧重于影响该应用性能的杂质——例如，电子应用的金属含量、电池应用的粒度、光学应用的折射率，或对水分敏感工艺的水分含量。

本产品应如何储存？

请于?20 °C条件下保存。避免反复冻融。建议按单次用量分装保存。

本产品如何运输？

本产品采用保温箱配冰袋运输。收货后请立即拆包，并按上述储存条件保存。

如何获取批次专用COA？

每个订单都会随附分析证书（COA），您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA，请联系您的客户代表，或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。

需要帮助选择级别？

我们的级别选择指南涵盖了目录中所有的变体的纯度、稳定剂状态和应用适用性。

查看 Animal Free 级别指南 → 查看 Carrier Free 级别指南 → 查看 Bioactive 级别指南 → 查看 ActiBioPure™ 级别指南 → 查看 EnzymoPure™ 级别指南 → 查看 RNase free 级别指南 → 查看 Sterile 级别指南 →

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