计算溶液所需的质量、体积或浓度。
BioReagent,标曲法 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
2-8°C储存,避光。低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
淀粉酶(Amylase,AMS)又称 1,4-α-D-葡聚糖水解酶,是水解淀粉和糖原的酶类总称,包括α-淀粉酶、β-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶。α-淀粉酶随机地作用于淀粉的非还原端,生成麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖,同时使淀粉浆的粘度下降,因此又称为液化酶。α-淀粉酶测定方法主要分为天然淀粉底物方法和确定底物方法,前者的方法有碘-淀粉法,后者有以麦戊糖或 4-NP-G 为底物的方法。
α-淀粉酶(α-AMS)活性检测试剂盒(DNS, 比色法)其检测原理是血清或血浆等样品中α-淀粉酶催化淀粉分子中的α-1,4 糖苷键水解,产生葡萄糖、麦芽糖以及糊精等还原性糖,麦芽糖在一定条件下和硝基水杨酸(DNS)反应生成棕红色化合物,在 540nm 处有最大吸光度,通过比色法检测产生的麦芽糖的量,以此表示酶的活力,可计算出淀粉酶的活力单位。α-淀粉酶不耐酸,在酸性条件下被迅速钝化;β-淀粉酶不耐热,在 70℃保温 15min会被钝化。萌发的种子中淀粉酶含量较高,且含有多种淀粉酶,其他样品中亦含多种淀粉酶,因此需要加热钝化β-淀粉酶才能测出准确的α-淀粉酶含量。用于检测植物或动物的细胞或组织裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的α-淀粉酶活性。其优点是灵敏、准确、精确度高,适宜精确测量小样品的α-淀粉酶活性;其缺点是测定步骤较繁,不便分析大量样品,测定范围较窄。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
产品组成:
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自备材料:
1、蒸馏水、生理盐水
2、水浴锅或恒温箱、离心管、离心机、容量瓶、比色杯或 96 孔板、分光光度计或酶标仪
操作步骤(仅供参考):
1、稀释标准品并绘制标准曲线:按下表稀释麦芽糖标准品,分别获得 0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1(mg/ml)的标准液。
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各孔加入 1ml DNS 显色液,充分混匀,沸水浴中煮沸 10min,取出后流水冷却,加蒸馏水定容至 10ml,以 0 号管为空白调零,分光光度计或酶标仪 540nm 处检测吸光度,以麦芽糖含量(mg)为横坐标,以标准管(1~6 号管)吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
注意:如果需要快速简易检测,则直接使用上述表格中"0"和"6"号管配合样品一起测定,根据公式计算即可。
2、准备样品:
①细胞或组织样品:取萌发的植物种子或细胞样品(组织应取 0.5g),用适当蒸馏水进行匀浆,清洗匀浆器,混合后置于室温下提取 20min,每隔数分钟摇动一次。然后于8000r/min 离心 10min,收集上清液转入 50ml 容量瓶中,补水定容,即为淀粉酶液,-20℃冻存,用于α-AMS 的检测。
②血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用蒸馏水 5~10 倍稀释后,可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-20℃冻存(但为了消除样品本身颜色的干扰,可设置加了血浆或血清但不加底物的对照)。
③(选做)样品准备完毕后可以用 BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的α-AMS 含量。
3、样品加样:按照下表设置样品对照管、样品测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品中的淀粉酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定,样品的检测最好能设置平行管。

4、α-AMS 测定:"0"号管调零,分光光度计(比色杯光径 1cm)或酶标仪测定各管 540nm处吸光度,记为 A 对照 和 A 测定。
计算:
α-淀粉酶活性单位的定义:α-淀粉酶在 40℃条件下每分钟催化水解底物产生 1mg 麦芽糖的酶量为一个酶活力单位。根据酶活性定义,计算出样品中的α-AMS 活性。
标准曲线计算公式:以麦芽糖含量(mg)为横坐标,以标准管(1~6 号)吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,继而计算出样品的酶活力单位。
液体样品:AMS 活力 [mg/(ml·min)] = (X × N) / (VS × t)
固体样品或组织:AMS 活力 [mg/(g·min)] = (X × VT × N) / (W × VS × t)
式中:
X = X测定 − X对照 = 根据标准曲线计算待测样品所对应的麦芽糖含量(mg)
VT = 淀粉酶提取原液总体积(ml)
N=待测样品稀释倍数
VS = 测定时取用的淀粉酶提取液体积(ml)= 0.5
t=反应时间(min)=5
W=组织等固体样品质量(g)
快速简易公式:如果需要快速简易检测,则使用 麦芽糖标准品 (1mg/ml) 根据公式计算即可。
液体样品: AMS 活力 [mg/(ml·min)] = A测定 × M × N / (A标准 × VS × t)
固体样品或组织:AMS 活力 [mg/(g·min)] = A测定 × M × N × VT / (A标准 × W × VS × t)
式中:
A测定 = 待测样品的吸光度
A标准 = 标准品的吸光度
M=标准管麦芽糖含量(mg)=1
VT=淀粉酶提取原液总体积(ml)
VS=测定时取用的淀粉酶提取液体积(ml)=0.5
N=待测样品稀释倍数
t=反应时间(min)=5
W=组织等固体样品质量(g)
注意事项:
本试剂盒亦可用酶标仪进行检测,但检测的样本数应相应增多。
待测样品中不能含有 AMS 抑制剂,同时需避免反复冻融。
本试剂盒也适用于其他样品的 AMS 测定,尿液检测应先作 10~20 倍稀释后测定。在分别测定总 AMS 和α-AMS 时,稀释倍数可能不同,需要分清清楚各自的稀释倍数。
淀粉酶测定缓冲液如果出现浑浊或絮状物,应弃用。
试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:6个月有效。按要求保存。
附录:标准曲线制作:参考说明书操作,用分光光度计 540nm 对系列麦芽糖标准(0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1mg/ml)进行吸光度的测定,其标准曲线如下(仅供参考):
α-淀粉酶(α-AMS)检测试剂盒(DNS比色法)

注意:由于检测仪器和操作手法等条件的不同,标准曲线会有差异,该值仅供参考,根据Aladdin测定经验显示麦芽糖标准浓度在 0.1mg/ml 以下,1.5mg/ml 以上标准曲线会有偏差。
Amylase (AMS), also known as 1,4-α-D-glucan hydrolase, refers to a class of enzymes that hydrolyze starch and glycogen. It primarily includes α-amylase, β-amylase, and glucoamylase. Among these, α-amylase acts randomly on the non-reducing ends of starch chains, producing reducing sugars such as maltose, maltotriose, and dextrins, while simultaneously reducing the viscosity of starch paste. Hence, it is also referred to as the liquefying enzyme. The methods for its determination are mainly divided into two categories: those using natural starch as the substrate (e.g., the iodine-starch method) and those based on defined substrates (e.g., maltopentaose or 4-NP-G). This assay kit is based on the following reaction process: α-amylase in the sample catalyzes the hydrolysis of α-1,4-glycosidic bonds in starch molecules, generating reducing sugars such as maltose. Under specific conditions, maltose reacts with 3,5-dinitrosalicylic acid (DNS) to form a brown-red compound, which exhibits maximum absorbance at 540 nm. By colorimetrically measuring the amount of maltose produced, the activity units of α-amylase can be calculated. Note: α-amylase is acid-labile and can be rapidly inactivated under acidic conditions, while β-amylase is heat-sensitive and can be inactivated by incubation at 70°C for 15 minutes. Since most biological samples (e.g., germinated seeds, tissue homogenates) often contain multiple types of amylases, a heat pretreatment step to inactivate β-amylase is required prior to the assay to ensure accurate measurement of α-amylase activity.
| 组分货号 | 组分名称 | 物理外观 | 100T | 储存 |
| A1515869A | 麦芽糖标准品 (2mg/ml) | 液体 | 10ml | 2-8℃. |
| A1515869B | α-淀粉酶测定缓冲液 | 液体 | 50ml | 2-8℃. |
| A1515869C | DNS显色液 | 液体 | 100ml | 2-8℃. 避光 |
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| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
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| 分析证书 | A1515869 |