细胞线粒体分离试剂盒

概述规格储存与运输技术文档高级数据质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱) 技术文档和文章溶液计算器常见问题

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为什么选择此级别

BioReagent,for western blot,用于聚丙烯酰胺凝胶电泳,用于蛋白分析级，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

2-8°C储存,-20°C储存。低温运输。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

细胞线粒体分离试剂盒是针对培养细胞设计的一种快速、便捷型的线粒体分离试剂。本试剂盒分离的线粒体纯度较高，绝大部分都含有完整的内膜和外膜，既可用于线粒体内、外膜完整性等生理功能等方面的研究，也可以用本试剂盒中提供的线粒体裂解液或其它适当裂解液裂解收集的线粒体，用于SDS-PAGE、Western、双向电泳等蛋白分析。同时，在使用本试剂盒分离线粒体时，也可获得去除线粒体的细胞浆蛋白，应用于细胞色素c等线粒体蛋白向胞浆的释放的分析。
如果每个样品的细胞数量为2~5×10⁷，该试剂盒可处理50~100个样品。

C777612	Component	1 Kit	Storage
C777612A	2×线粒体分离试剂	65 mL	-20℃
C777612B	线粒体储存液	15 mL	-20℃. Store in the dark.
C777612C	线粒体裂解液	15 mL	-20℃. Store in the dark.
C777612D	台盼蓝染色液	10 mL	2-8℃. Store in the dark.
C777612E	PMSF	1 mL	-20℃. Store in the dark.

使用说明：
1、试剂准备
1.1 准备溶液：室温融解试剂盒中的各种溶液，溶解后立即置于冰上并混匀
1.2 线粒体分离试剂：用等体积的蒸馏水将2×线粒体分离试剂稀释为1×线粒体分离试剂。
1.3 如果最终目的是制备线粒体蛋白样品：
线粒体分离试剂：在分离试剂中加入蛋白酶抑制剂或PMSF。
线粒体裂解液：在裂解液中加入蛋白酶抑制剂或PMSF。
2、细胞准备
2.1 收集细胞：
对于贴壁细胞：用PBS洗一遍，用胰酶细胞消化液消化细胞，离心收集细胞；
对于悬浮细胞：直接离心收集细胞。
2.2 洗涤细胞：用预冷的PBS轻轻重悬细胞沉淀，取少量细胞用于计数，剩余细胞600g，4°C 离心5min沉淀细胞。弃上清。
3、细胞匀浆及匀浆效果鉴定
3.1 在 2~5×10⁷细胞中，加入1~2.5mL线粒体分离试剂，轻轻悬浮细胞，冰浴放置10-15min。
3.2 把细胞悬液转移到适当大小的玻璃匀浆器中，匀浆10-30下左右。
3.3 通常可在匀浆10次后取约2µL细胞匀浆，稀释20倍后加入台盼蓝染色液，混匀后显微镜下观察台盼蓝染色阳性(蓝色)细胞的比例。如果阳性细胞比例不足50%，增加5次匀浆。随后再同前取样进行台盼蓝染色鉴定。当阳性比例超过50%时即可停止匀浆进入下一步。
4、线粒体的收集
4.1 把细胞匀浆在600g，4°C离心10min。
注：如需获得纯度更高的线粒体，可以将此步骤的离心速度改为1000g，其它离心条件不变；获得更高纯度线粒体的缺点是相同数量细胞的线粒体抽提得率会下降。
4.2 小心把上清转移到另一离心管中，在11000g，4°C离心10min。
注：如需获得纯度更高的线粒体，可以将此步骤的离心速度改为3500g，其它离心条件不变；获得更高纯度线粒体的缺点是相同数量细胞的线粒体抽提得率会下降。
4.3 小心去除上清。沉淀即为分离得到的细胞线粒体。
注：如果希望获得去除线粒体的细胞浆蛋白，在本步骤，收集上清，并在收集上清时注意勿触及沉淀。随后把收集的上清12000g，4°C离心10min。取上清即为去除线粒体的细胞浆蛋白。
5、线粒体的使用
5.1 如果用于完整线粒体的功能或酶活性研究，初始2~5×10⁷细胞分离得到的线粒体样品中可以加入150-200µL线粒体储存液，重悬线粒体。
5.2 如果用于线粒体的蛋白分析，初始2~5×10⁷细胞分离得到的线粒体样品中可加入150-200µL 线粒体裂解液处理线粒体。裂解后的线粒体可以用于PAGE、Western、IP以及线粒体中的一些酶活性的测定等。裂解后的蛋白样品可用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。
5.3 如果用于双向电泳，请使用适当的用于双向电泳的裂解液处理线粒体。
注意事项：
1、试剂盒不提供PBS、BCA蛋白定量试剂盒。
2、如果不用于制备线粒体蛋白样品，线粒体分离试剂和线粒体裂解液中不必加入蛋白酶抑制剂或PMSF。反之，如果用于制备线粒体蛋白样品，需在线粒体分离试剂和线粒体裂解液中加入蛋白酶抑制剂或PMSF。
3、分离线粒体的所有步骤均在冰上或4°C进行，所用溶液需冰浴或4°C预冷。
4、通常在分离线粒体时前后两次离心速度选取600g和11000g，如果希望纯度更高，但对线粒体的得率要求不高，前后两次离心速度可以采用1000g和3500g。
5、对于大量制备，可根据细胞数，按比例放大所使用的试剂。
6、为了您的自身安全，使用试剂前，请做好防护，如穿实验服，带手套等。

规格

规格或纯度

BioReagent, 用于聚丙烯酰胺凝胶电泳, 用于蛋白分析, for western blot, 50-100T

英文名称

Cell Mitochondria Isolation Kit

应用

PAGE, WB

敏感性

Light-sensitive

储存与运输

储存条件

2-8°C储存,-20°C储存

运输条件

低温运输

稳定性与储存

C777612A, C777612B, C777612C, C777612E: Store at -20℃ long term (12 months). Store in the dark. C777612D: Store at 2-8℃ long term (12 months). Store in the dark.

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

全面的危险、操作、储存及法规合规文件。

下载 SDS →

✅ 分析证书 (COA)

批次质量数据。输入批号以获取对应 COA。

查询 COA →

📊 产品数据表

产品规格和应用的快速参考摘要。

查看数据表 →

🔬 规格说明书

该级别的完整质量属性和验收标准。

查看规格说明 →

高级数据

质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):

输入批号以搜索分析图谱:

通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA，每批产品都进行了严格的验证，您可放心使用！

找到7个结果

批号(Lot Number)	证书类型	货号
I2629189	分析证书	C777612
ZJ25F0723710	分析证书	C777612
ZJ25F0723711	分析证书	C777612
ZJ25F0723712	分析证书	C777612
ZJ25F0723713	分析证书	C777612
ZJ25F0723714	分析证书	C777612
D2629304	分析证书	C777612

技术文档和文章

c777612_细胞线粒体分离试剂盒产品说明书.pdf

用于蛋白分析

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溶液计算器

摩尔浓度计算器

计算溶液所需的质量、体积或浓度。

质量

浓度

体积

分子量

g/mol

稀释计算器

计算配制储备溶液所需的稀释度。

浓度1（C1）

体积 1 (V1)

浓度 2 (C2)

体积 2 (V2)

复溶计算器

复溶计算器允许您快速计算试剂的体积，以复溶小瓶。只需输入试剂的质量和目标浓度，计算器将确定其余部分。

体积（添加到小瓶中）

质量（小瓶）

所需的复溶浓度

常见问题

什么是「用于聚丙烯酰胺凝胶电泳」？

「用于聚丙烯酰胺凝胶电泳」表示该产品经过加工和检测，适用于电泳和印迹。典型规格包括：低或不可检测的核酸酶/蛋白酶活性、低内毒素、受控的微生物限度，以及高批间重现性。

什么是「BioReagent」？

「BioReagent」表示该产品经过加工和检测，适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性，以及在相关情况下的生物活性验证。

本产品应如何储存？

请于?20 °C条件下保存。需冷藏保存以维持规定的有效期。

本产品如何运输？

本产品采用湿冰冷藏运输。收货后请立即拆包，并按上述储存条件保存。

如何获取批次专用COA？

每个订单都会随附分析证书（COA），您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA，请联系您的客户代表，或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。

选择需要帮助选择级别？

我们的级别选择指南涵盖了目录中所有的变体的纯度、稳定剂状态和应用适用性。

查看 BioReagent 级别指南 → 查看 for PAGE 级别指南 → 查看 for Protein analysis 级别指南 → 查看 for Western blot 级别指南 →

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