计算溶液所需的质量、体积或浓度。
BioReagent 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
避光,-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
ATP生物发光技术的原理是荧光素酶以荧光素、三磷酸腺苷(ATP)和O2为底物,在Mg2+存在时,能将化学能转化为光能。ATP既是荧光素酶催化发光的必需底物,又是所有生物生命活动的能量来源。在荧光素酶催化的发光反应中,ATP在一定的浓度范围内,其浓度与发光强度呈线性关系。3D细胞培养技术已经成为非常常用的研究工具,也越来越受欢迎,在基础研究和药物发现等中的应用越来越广泛,而3D培养条件下的细胞活性检测也成为一大难点。
发光法3D细胞活力检测试剂是一种基于荧光素酶系统的细胞活力检测试剂。检测试剂经优化具有更强的裂解能力,可有效渗透至3D培养形成的球状体内部,更适用于专门用于检测3D细胞培养产生的微组织 (micro tissue) 的细胞活力。在细胞培养物中加入产品使细胞团裂解,释放出ATP,即可发出稳定的“辉光型”发光信号,信号强度与ATP的量在一定范围内成正比,间接反映样品中活细胞数量,因此产品可对活细胞数目进行定量检测。

产品特点:
1、安全操作方便快捷:无需洗涤细胞、更换或去除培养液,只需加入与细胞培养液等体积的检测试剂,振荡混匀5分钟,室温孵育25分钟后即可进行化学发光检测。
2、使用灵活便捷,适用范围广:既适用于少量样品的检测,也适用于大量样品的高通量筛选,以及不同方法培养出的3D细胞球活性检测。
3、发光强度高,信号稳定:本产品对于相同种类细胞样品的发光信号强于国外同类产品,且发光信号更加稳定。
使用说明:
一、3D微组织的准备
使用适合进行发光检测的不透明壁多孔板培养3D微组织。应根据实验条件对样品体积和微组织的特性(如大小、数量、培养天数等)进行优化。如有需要,可根据具体实验需要加入药物处理细胞,并根据您自己的培养操作步骤进行孵育。
二、检测试剂的准备
融解冻存的发光法3D细胞活力检测试剂,如有必要可适当分装该试剂。在使用前将适量试剂平衡至室温。上下颠倒轻柔混匀,以获得均质溶液。
三、微组织细胞活力检测
1、取出含微组织的多孔板在室温平衡30min。
2、将与细胞培养基等体积的试剂直接加入到细胞培养物中(例如,96孔板每孔含100μL细胞培养基,则加入100μL 发光法3D细胞活力检测试剂)。
3、振荡混匀5min,促进细胞团裂解。
4、将培养板在室温继续孵育25min,使发光信号趋于稳定。(检测试剂渗透进入微组织及发光信号趋于稳定的时间与细胞的种类、培养时间、微组织的大小都有一定的关系,可以使用移液器反复吹打来代替振荡,也可以在检测试剂加入后振荡5min、再孵育5min后开始检测,并每隔5min左右测定一次,取信号趋于平稳的时间点的数值作为实验数据。)
5、使用具有检测化学发光功能的多功能酶标仪进行化学发光检测。请根据仪器要求设置相应的参数,每个孔的检测时间一般为0.25-1s或更长时间,具体需根据仪器的检测灵敏度进行适当的调整。记录发光值。
注意事项:
1、荧光素酶的活性对温度比较敏感,所以反应前细胞和检测试剂均需平衡至室温后再进行测定。请勿室温存放。
2、检测试剂请混匀后使用。
3、本试剂盒的检测试剂中含有荧光素酶,反复冻融会导致其逐渐失活。为取得良好的使用效果,第一次解冻后可适当分装保存,但需注意分装的容器不能有ATP污染。
4、待测药物的溶剂含量较高时可能会干扰荧光素酶反应,从而影响化学发光信号。可以通过设置含有溶剂的细胞培养液对照孔排除溶剂的干扰。
5、只有当待测细胞团与本试剂完全混合接触,将细胞充分裂解时才能获得最佳的检测效果。若细胞团未充分裂解,致使复孔间发光值不均匀,可通过适当增加振板幅度或延长孵育条件进行优化。
6、检测时需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板,相邻孔之间会产生相互干扰。也可使用专为3D培养的超低吸附培养皿或多孔板培养好3D细胞后,转移至普通的白色或黑色多孔板中进行检测。
7、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
8、为了您的安全和健康,操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA,每批产品都进行了严格的验证,您可放心使用!
| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
| 分析证书 | D1374056 |