核酸内切酶 VIII

货号: E745665
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级别和纯度: 无动物源 ? 无动物源(Animal Free)—— 不含动物源成分生产,降低污染风险。适用于避免动物源材料的生物制造和培养。 无载体 ? 无载体(Carrier Free)—— 不含添加的载体蛋白/稳定剂。当载体(如 BSA)会干扰偶联或敏感检测时使用。 生物活性 ? 生物活性级(Bioactive)—— 经验证在功能检测中保持生物活性。当分子须具有功能活性而不仅是纯度时使用。 无DNA酶和RNA酶 ? 无 DNase 和 RNase 活性,保持 DNA 和 RNA 完整。适用于存在降解风险的核酸提取、PCR 和储存。 ActiBioPure™ ? ActiBioPure™ —— 阿拉丁面向生物活性和重组产品的优质系列。当同时需要高纯度和保持生物活性时使用。 EnzymoPure™ ? EnzymoPure™ —— 阿拉丁的高质量酶解决方案系列。当酶纯度和明确活性决定检测或工艺性能时使用。 无菌 ? 无菌级 —— 经处理并验证无活微生物。可直接用于无菌操作和细胞培养,无需再灭菌。 ≥95%(SDS-PAGE) 10 U/μL
Accession #
P50465.3
表达系统
E. coli
生物活性
One unit is defined as the amount of enzyme required to cleave 1pmol of a 34 mer oligonucleotide duplex containing a single AP site in a total reaction volume of 10μl in 1 hour at 37℃ in 1X Endonuclease VIII Reaction Buffer containing 10pmol of fluorescently labeled oligonucleotide duplex
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规格
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1KU
E745665-1KU
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¥409.90
5×1KU
E745665-5×1KU
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¥1,599.90
20×1KU
E745665-20×1KU
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为什么选择此级别

ActiBioPure™,EnzymoPure™,无DNA酶和RNA酶,无动物源,无菌,无载体,生物活性 级 提供 ≥95%(SDS-PAGE) 纯度,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

本公司生产的核酸内切酶 VIII,即 Endonuclease VIII 来自大肠杆菌,是由阿拉丁自主研发的技术平台表达、纯化获得的重组内切酶。Endonuclease VIII 是一种 DNA 损伤修复酶,具有 N-糖基化酶(N-glycosylase)活性和 AP 裂解酶(AP-lyase)活性。Endonuclease VIII 的 N-糖基化酶活性能切下并释放双链 DNA 上受损的嘧啶碱基(Pyrimidines)从而产生一个脱嘌呤(Apurinic, AP)位点;Endonuclease VIII 的 AP 裂解酶活性,可以切割 AP位点的 3'和 5'端,从而切除 AP 位点,产生一个具有 3'和 5'磷酸的碱基缺口(Gap)。可以被Endonuclease VIII 识别并切除的受损碱基包括:Urea、5,6-dihydroxythymine (5,6-二羟基胸腺嘧啶)、Thymine glycol (胸腺嘧啶乙二醇)、5-hydroxy-5-methylhydantoin (5-羟基-5-甲内酰脲)、Uracilglycol (尿嘧啶乙二醇)、6-hydroxy-5,6-dihydrothymine (6-羟基-5,6-二氢胸腺嘧啶)和 Methyltartronylurea (甲基羟丙二酰脲) 。虽然Endonuclease VIII 与 Endonuclease III 相似,但 Endonuclease VIII 具有β和δ裂解酶活性,而 Endonuclease III 仅具有β裂解酶活性。
组分和说明

E745665Component1KU5×1KU 20×1KUStorage
E745665AEndonuclease VIII (10U/µl)100μl5×100μl20×100μl-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
E745665B10X Endonuclease VIII Buffer0.4mL5×0.4mL20×0.4mL-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

产品应用
可用于 DNA 损伤和修复研究;单细胞凝胶电泳;碱洗脱;碱解螺旋;识别并切除双链 DNA 上受损的嘧啶碱基;切割 AP 位点的 3'和 5'端而产生一
个具有 3'和 5'磷酸的碱基缺口(Gap)。 

产品优势
高效的 DNA 损伤修复能力,广泛的应用场景,高纯度和稳定性。 

使用说明
1.使用 Endonuclease VIII 切除双链 DNA 中的 AP 位点。
a.双链 DNA 的制备:使用Annealing Buffer for DNA Oligos (5X) 使单链 DNA (中间含有一个或多个脱氧尿嘧啶碱基)和其互补链 DNA (中间不含有脱氧尿嘧啶碱基)退火形成双链 DNA。
b.含 AP 位点双链 DNA 的制备:使用 Uracil-DNA Glycosylase (E. coli)/Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Bacterium)/Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile,Cod)处理退火双链 DNA,生成含有 AP 位点的双链 DNA。
c.切除双链 DNA 中的含 AP 位点的:
(a)参考下表在冰浴中配制反应体系。

Component Volume
Ultrapure Water (DNase/RNase-Free, Sterile)15µl
10X Endonuclease VIII Buffer 2µl
dsDNA with AP site (10µM/µl) 2µl
Endonuclease VIII (10U/µl)1µl

注:请把除 Endonuclease VIII 以外的组分充分混匀后再加入 Endonuclease VIII,加入 Endonuclease VIII 后可以用移液器吹打混匀。
如果待酶切 DNA 量较大,可以适当延长酶切时间或按比例放大酶切体系。
(b)反应条件:37℃,30 分钟。
(c)终止反应:75℃加热 10 分钟,或者冰浴孵育 1-2 分钟并加入 2X RNA Loading Buffer 。
保存条件:
-20℃保存,≤0℃运输
注意事项:
(1)本产品中在使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
(2)本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
(3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


规格

产品名称
核酸内切酶 VIII
别名
核酸内切酶 VIII | 核酸内切酶8
英文别名
Endonuclease 8 | nei | ECK0703
规格或纯度
ActiBioPure™, 无动物源, 无载体, 生物活性, EnzymoPure™, 无DNA酶和RNA酶, 无菌, ≥95%(SDS-PAGE), 10 U/μL
生物活性
One unit is defined as the amount of enzyme required to cleave 1pmol of a 34 mer oligonucleotide duplex containing a single AP site in a total reaction volume of 10μl in 1 hour at 37℃ in 1X Endonuclease VIII Reaction Buffer containing 10pmol of fluorescently labeled oligonucleotide duplex
表达系统
E. coli
种属
大肠杆菌(E.coli)
无载体
Yes
无动物源
Yes
Accession #
来源
重组表达
分子类型
酶
储存与运输
物理形态
液体
储存缓冲液
10mM Tris-HCl, 250mM NaCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 50%(v/v) Glycerol, pH 8.0
浓度
10 U/μL
储存条件
-20°C储存,避免反复冻融
运输条件
超低温运输
稳定性与储存
长期储存-20℃(24个月);避免反复冻融。
单位定义
One unit is defined as the amount of enzyme required to cleave 1pmol of a 34 mer oligonucleotide duplex containing a single AP site in a total reaction volume of 10μl in 1 hour at 37℃ in 1X Endonuclease VIII Reaction Buffer containing 10pmol of fluorescen

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批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ25F0623450 分析证书 E745665
技术文档和文章
溶液计算器