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ActiBioPure™,EnzymoPure™,无DNA酶和RNA酶,无动物源,无菌,无载体,生物活性 级 提供 ≥95%(SDS-PAGE) 纯度,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
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在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
本公司生产的核酸内切酶 VIII,即 Endonuclease VIII 来自大肠杆菌,是由阿拉丁自主研发的技术平台表达、纯化获得的重组内切酶。Endonuclease VIII 是一种 DNA 损伤修复酶,具有 N-糖基化酶(N-glycosylase)活性和 AP 裂解酶(AP-lyase)活性。Endonuclease VIII 的 N-糖基化酶活性能切下并释放双链 DNA 上受损的嘧啶碱基(Pyrimidines)从而产生一个脱嘌呤(Apurinic, AP)位点;Endonuclease VIII 的 AP 裂解酶活性,可以切割 AP位点的 3'和 5'端,从而切除 AP 位点,产生一个具有 3'和 5'磷酸的碱基缺口(Gap)。可以被Endonuclease VIII 识别并切除的受损碱基包括:Urea、5,6-dihydroxythymine (5,6-二羟基胸腺嘧啶)、Thymine glycol (胸腺嘧啶乙二醇)、5-hydroxy-5-methylhydantoin (5-羟基-5-甲内酰脲)、Uracilglycol (尿嘧啶乙二醇)、6-hydroxy-5,6-dihydrothymine (6-羟基-5,6-二氢胸腺嘧啶)和 Methyltartronylurea (甲基羟丙二酰脲) 。虽然Endonuclease VIII 与 Endonuclease III 相似,但 Endonuclease VIII 具有β和δ裂解酶活性,而 Endonuclease III 仅具有β裂解酶活性。
组分和说明
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产品应用
可用于 DNA 损伤和修复研究;单细胞凝胶电泳;碱洗脱;碱解螺旋;识别并切除双链 DNA 上受损的嘧啶碱基;切割 AP 位点的 3'和 5'端而产生一
个具有 3'和 5'磷酸的碱基缺口(Gap)。
产品优势
高效的 DNA 损伤修复能力,广泛的应用场景,高纯度和稳定性。
使用说明
1.使用 Endonuclease VIII 切除双链 DNA 中的 AP 位点。
a.双链 DNA 的制备:使用Annealing Buffer for DNA Oligos (5X) 使单链 DNA (中间含有一个或多个脱氧尿嘧啶碱基)和其互补链 DNA (中间不含有脱氧尿嘧啶碱基)退火形成双链 DNA。
b.含 AP 位点双链 DNA 的制备:使用 Uracil-DNA Glycosylase (E. coli)/Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Bacterium)/Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile,Cod)处理退火双链 DNA,生成含有 AP 位点的双链 DNA。
c.切除双链 DNA 中的含 AP 位点的:
(a)参考下表在冰浴中配制反应体系。
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注:请把除 Endonuclease VIII 以外的组分充分混匀后再加入 Endonuclease VIII,加入 Endonuclease VIII 后可以用移液器吹打混匀。
如果待酶切 DNA 量较大,可以适当延长酶切时间或按比例放大酶切体系。
(b)反应条件:37℃,30 分钟。
(c)终止反应:75℃加热 10 分钟,或者冰浴孵育 1-2 分钟并加入 2X RNA Loading Buffer 。
保存条件:
-20℃保存,≤0℃运输
注意事项:
(1)本产品中在使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
(2)本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
(3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
| 分析证书 | E745665 |
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