葡萄糖氧化酶 (GOD) 活性检测试剂盒 (4-氨基安替比林, 比色法)

货号: G1516001
有货
级别和纯度: BioReagent ? 生物试剂级(BioReagent)—— 经测试适用于生命科学和分子生物学。适用于需要生物相容性的细胞培养、检测和生化工作。 标曲法 ?
★
规格
库存
价格
数量
48T
G1516001-48T
现货 Stock Image
¥499.90
请输入您要添加的产品数量
🧪
为什么选择此级别

BioReagent,标曲法 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

🌡

储存与运输

2-8°C储存,避光。低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

📋

质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

📚

文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

葡萄糖氧化酶 (GOD,EC 1.1.3.4) 是一种广泛存在于多种微生物中的氧化还原酶。在有氧环境中,GOD 能够特异性催化葡萄糖与氧气发生反应,生成葡萄糖酸和过氧化氢。基于这一反应特性,常采用 Trinder 显色体系实现酶活性的定量检测:反应生成的过氧化氢在过氧化物酶 (POD) 的催化下,可与 4 - 氨基安替比林 (4-AAP) 和苯酚组成的经典色原底物组合发生氧化缩合,生成粉红色的醌亚胺类产物;该产物在 510 nm 波长处具有最大特征吸收峰,通过分光光度计测定吸光度的变化量,即可换算得到葡萄糖氧化酶的酶活性大小。

组分与储存:

组分货号组分名称物理外观48T储存
G1516001A提取液液体60 mL2-8℃.
G1516001B试剂一液体15 mL2-8°C. 避光
G1516001C试剂二液体15 mL2-8°C. 避光
G1516001D试剂三粉末2 vial2-8℃.
G1516001E标准品液体1 vial2-8℃.
注*试剂三 (每支):
1. 开盖前注意使粉体落入底部(可手动甩一甩);
2. 每支加1.2mL的蒸馏水溶解备用;
3. 保存周期与试剂盒有效期相同。

自备仪器和试剂:

⁕ 分光光度计 (能测510nm处的吸光度)

⁕ 研钵 (匀浆机)、冰盒 (制冰机)、台式离心机、可调式移液枪、水浴锅 (烘箱、培养箱、金属浴)、1mL比色皿、离心管

⁕ 蒸馏水 (去离子水、超纯水均可)

指标测定:

建议正式实验前选取2个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!

1、样本制备:

① 组织样本:0.1g组织样本 (水分充足的样本建议取0.2g左右),加1mL的提取液冰浴匀浆,粗提液全部转移到EP管中,12000rpm,4℃离心10min,上清液待测。

② 细胞/细菌样本:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;取约500万细胞/细菌加入1mL的提取液,超声波破碎细胞/细菌 (冰浴,功率200W,超声3s,间隔10s,重复30次);12000rpm 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

注:若增加样本量,可按照细胞数量 (10⁴):提取液 (mL) 为 500~1000:1的比例进行提取。

2、上机检测:

① 可见分光光度计预热30min,设定波长到510nm,蒸馏水调零。

② 所有室温至室温 (25℃)。在1mL玻璃比色皿 (光径1cm) 中依次加入:

试剂名称 (μL)测定管
试剂一300
试剂二300
样本60
/混匀,37℃孵育5min
试剂三40
混匀,于510nm下读取吸光值A₁,37℃孵育20min后读取吸光值A₂,ΔA=A₂−A₁。

注:若ΔA值在零附近,则增加样本加样体积V₁ (如增至50μL,则试剂一相应减少),或延长反应时间T (如延长至40min或60min),则改变后的V₁和T需代入公式重新计算。

结果计算:

1、标准曲线:y=4.9206x-0.0063:x为H₂O₂标准品 (μmol),y为ΔA。

2、按样本鲜重计算:

单位定义:在37℃,每克组织每小时生成 1μmol H₂O₂ 定义为一个酶活单位 (U)。

GOD (μmol/h/g 鲜重)=[(ΔA+0.0063)÷4.9206]÷(W×V₁÷V)÷T =10.2×(ΔA+0.0063)÷W

3、按样本蛋白浓度计算:

单位定义:在37℃,每毫克组织蛋白每小时生成 1μmol H₂O₂ 定义为一个酶活单位 (U)。

GOD (μmol/h/mg prot)=[(ΔA+0.0063)÷4.9206]÷(V₁×Cpr) ÷T=10.2×(ΔA+0.0063)÷Cpr

4、按细胞/细菌数量计算:

单位定义:在37℃,每10⁴个细胞/细菌每小时生成 1μmol H₂O₂ 定义为一个酶活单位 (U)。

GOD (μmol/h/10⁴ cell)=[(ΔA+0.0063)÷4.9206]÷(500×V₁÷V)÷T=0.02×(ΔA+0.0063)

V:加入提取液体积,1 mL

V₁:加入样本体积,0.06mL

T:反应时间,20min=1/3h

W:样本质量, g

500:细胞数量,万

Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL

附:标准曲线制作过程:

1. 标准品母液浓度为250μmol/mL。将母液用蒸馏水稀释成六个浓度梯度的标准品,例如:0,0.5,1,1.5,2,2.5μmol/mL。也可根据实际样本调整标准品浓度。

2. 标品稀释参照表如下:

1. 吸取标准品母液100uL,加入900uL蒸馏水,混匀得到25μmol/mL的标品稀释液;
2. 吸取25μmol/mL的标品稀释液100uL,加入900uL蒸馏水,混匀得到2.5μmol/mL的标品稀释液待用。
标品浓度 (μmol/mL)00.511.522.5
标品稀释液 (μL)04080120160200
水 (μL)20016012080400
注:各标准管混匀待用。

3. 依据加样表操作,根据结果,以各浓度吸光值减去0浓度吸光值,过0点制作标准曲线。

试剂名称 (μL)标准管空白管 (仅做一次)
标准品600
蒸馏水/60
试剂一340340
试剂二300300
注:混匀于510nm 处读值,ΔA=A测定-A空白


规格

别名
GOD检测试剂盒 | 葡萄糖氧化酶活性 (GOD) 检测试剂盒
英文别名
GOD Activity Assay Kit
规格或纯度
BioReagent, 标曲法
英文名称
Glucose Oxidase (GOD) Activity Assay Kit (4-AAP, Colorimetric Method)
应用
酶活性检测
样品类型
动物组织, 细胞, 细菌
检测方法
分光光度法
定量&半定量
定量
检测仪器
可见光分光光度计
检测波长
510nm
敏感性
Light-sensitive
储存与运输
储存条件
2-8°C储存,避光
运输条件
低温运输
稳定性与储存
Store at 2-8℃ long term (3 months).
组分与储存
组分货号组分名称物理外观48T储存
G1516001A提取液液体60 mL2-8℃.
G1516001B试剂一液体15 mL2-8°C. 避光
G1516001C试剂二液体15 mL2-8°C. 避光
G1516001D试剂三粉末2 vial2-8℃.
G1516001E标准品液体1 vial2-8℃.
注*试剂三 (每支):
1. 开盖前注意使粉体落入底部(可手动甩一甩);
2. 每支加1.2mL的蒸馏水溶解备用;
3. 保存周期与试剂盒有效期相同。

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

全面的危险、操作、储存及法规合规文件。

下载 SDS →

✅ 分析证书 (COA)

批次质量数据。输入批号以获取对应 COA。

查询 COA →

📊 产品数据表

产品规格和应用的快速参考摘要。

查看数据表 →

🔬 规格说明书

该级别的完整质量属性和验收标准。

查看规格说明 →

高级数据

质检证书(CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
输入批号以搜索分析图谱:

通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA,每批产品都进行了严格的验证,您可放心使用!

找到1个结果

批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ26F0938876 分析证书 G1516001
技术文档和文章
氧化酶在微生物与酵母代谢网络中的功能体系
Functional Systems of Oxidases in Microbial and Yeast Metabolic Networks
β-葡聚糖含量测定方法、样品前处理与质量控制
β-Glucan Content Determination Methods, Sample Pretreatment and Quality Control
葡萄糖酶法检测技术比较:葡萄糖氧化酶、葡萄糖脱氢酶与己糖激酶法的应用选择
Comparison of Enzymatic Glucose Detection Methods: Glucose Oxidase, Glucose Dehydrogenase, and Hexokinase Methods
糖类氧化酶:催化机制与生物分析应用
Carbohydrate Oxidases: Catalytic Mechanisms and Bioanalytical Applications
溶液计算器

常见问题

本产品应如何储存?
请于2–8 °C、避光条件下保存。本品对光敏感,请保存在原始的避光或棕色容器中。
本产品如何运输?
本产品采用湿冰冷藏运输。收货后请立即拆包,并按上述储存条件保存。
什么是「BioReagent」?
「BioReagent」表示该产品经过加工和检测,适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性,以及在相关情况下的生物活性验证。
如何获取批次专用COA?
每个订单都会随附分析证书(COA),您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA,请联系您的客户代表,或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。