重组糖基肽酶F

CAS: 83534-39-8 货号: P755115 EC号: 964-131-3
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级别和纯度: 生物活性 ? 生物活性级(Bioactive)—— 经验证在功能检测中保持生物活性。当分子须具有功能活性而不仅是纯度时使用。 ActiBioPure™ ? ActiBioPure™ —— 阿拉丁面向生物活性和重组产品的优质系列。当同时需要高纯度和保持生物活性时使用。 高性能 ? 高性能级 —— 纯度和性能特性经过优化。适用于普通等级无法满足的灵敏分析。 EnzymoPure™ ? EnzymoPure™ —— 阿拉丁的高质量酶解决方案系列。当酶纯度和明确活性决定检测或工艺性能时使用。 His标签 ? 组氨酸(His) 标签级 —— 带有 His 标签的重组蛋白,供亲和纯化/检测。用于纯化、固定或检测带标签蛋白。 ≥95%(SDS-PAGE&SEC-HPLC) ≥30000U/mg protein
Accession #
P21163
蛋白标签
N-His
表达系统
E. coli
生物活性
≥30000U/mg protein (150000U/mL) ,单位定义:10 μl 的反应体系中,37℃反应 1 小时从10 μg 变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。
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15KU
P755115-15KU
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为什么选择此级别

ActiBioPure™,EnzymoPure™,His标签,生物活性,高性能 级 提供 ≥95%(SDS-PAGE&SEC-HPLC) 纯度,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 1 篇同行评审文献引用。

概述

PNGase F全称肽 N-糖苷酶F,基因来源于Elizabethkingia miricola。PNGase F 是一种胺酶,切割糖蛋白上的 N-连接糖链。切割的糖型有:高甘露糖、杂合和复杂寡糖;切割位点为:最内侧的 N-乙酰葡糖胺和天冬酰胺之间的糖苷键,能够将绝大多数 N-糖链(除含 α-1,3 连接的核心岩藻糖)。适用于蛋白质组学及糖生物学研究中糖蛋白上 N-连寡糖链的有效释放。
反应式


最佳反应条件:最适反应 pH:7.5;热失活条件:75℃处理10 min。

组分和说明

P755115Component15000U5×15000UStorage
P755115APNGase F15000U5×15000U-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
P755115B10×Glycoprotein Denaturing Buffer (0.5% SDS, 40mM DTT)1000μl5×1000μl-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
P755115C10×GlycoBuffer 2 (500 mM Sodium Phosphate, pH7.5)1000μl5×1000μl-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
P755115D10% NP-401000μl5×1000μl-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

变性条件下糖蛋白去糖基化
1、用去离子水溶解1-20 µg的糖蛋白,加入1 µl 的10×Glycoprotein Denaturing Buffer,用去离子水定容到10 µl;
2、75℃孵育 10 min;
3、加入2 µl 的 10×GlycoBuffer 2,2 µl 的10% NP-40,轻轻吹打混匀;
4、加入1-2 µl 的 PNGase F,加去离子水到20 µl,轻轻吹打混匀;
5、37℃孵育1-3hr;
6、用于SDS-PAGE分析或HPLC 分析。
非变性条件下糖蛋白去糖基化
1、取10-100µg 糖蛋白溶液,加入 2µl 10×Glyco 缓冲液 2-5µl PNGase F,补加纯化水使得反应体系总 体积为 20µl,轻柔混匀; 

2、37℃条件下反应 4-24hr。 

注意:当对天然糖蛋白去糖基化时,建议将等量糖蛋白样品进行变性后再同步进行酶切实验作为阳性对照, 以确定非变性条件下去糖基化反应的程度。 

【注】孵育时间或酶量需要根据实际情况进行优化。 

注意事项 

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。本产品仅作科研用途! 


规格

产品名称
重组糖基肽酶F
别名
N-糖苷酶F | 糖苷酶F | 肽N-糖苷酶
英文别名
N-Glycosidase F | Peptide N-glycosidase | peptide-N(4)-(N-acetyl-beta-glucosaminyl)asparagine amidase | glycopeptidase | glycopeptide N-glycosidase | N-glycanase | N-oligosaccharide glycopeptidase | ngl
规格或纯度
生物活性,ActiBioPure™,高性能,EnzymoPure™,His标签,≥95%(SDS-PAGE&SEC-HPLC),≥30000U/mg protein
生化机理
从糖蛋白切割整个聚糖,前提是糖基化天冬酰胺部分在其氨基和羧基末端被多肽链取代。
生物活性
≥30000U/mg protein (150000U/mL) ,单位定义:10 μl 的反应体系中,37℃反应 1 小时从10 μg 变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。
表达系统
E. coli
种属
伊丽莎白病(Elizabethkingia miricola)
蛋白标签
N-His
来源
重组表达
SDS-PAGE
35 kDa
CAS编号和信息
83534-39-8
酶学委员会编号
EC 3.5.1.52
分子类型
酶
产品线
生物产品
储存与运输
物理形态
液体
储存缓冲液
20 mM Tris-HCl, 200mM NaCl, 10% Glycerol, pH 7.5.
浓度
≥30000U/mg protein
储存条件
-20°C储存,避免反复冻融
运输条件
超低温运输
稳定性与储存
长期储存-20℃(18个月);避免反复冻融。

技术文档

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高级数据

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批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ25F0724138 分析证书 P755115
技术文档和文章
此产品的引用文献
溶液计算器

常见问题

「ActiBioPure?」是什么?
「ActiBioPure?」是阿拉丁科学的高端产品线之一,专为多个工作流程中的高纯度应用而设计。与同类工作流程中的标准级别相比,「ActiBioPure?」产品通常具有更严格的规格、更严谨的 QC 以及更强的批间一致性。
什么是「生物活性」?
「生物活性」表示该产品经过加工和检测,适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性,以及在相关情况下的生物活性验证。
本产品应如何储存?
请于?20 °C条件下保存。避免反复冻融。建议按单次用量分装保存。
本产品如何运输?
本产品采用保温箱配冰袋运输。收货后请立即拆包,并按上述储存条件保存。
本产品的 CAS 号、分子式和分子量是多少?
本产品的 CAS 号为 83534-39-8。
如何获取批次专用COA?
每个订单都会随附分析证书(COA),您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA,请联系您的客户代表,或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。