碱性磷酸酶 (ALP)

CAS: 9001-78-9 货号: P755408 EC号: 232-631-4 PubChem CID: 18985873
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Accession #
P00634
生物活性
≥40 U/mg enzyme powder
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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 53 篇同行评审文献引用。

概述


This product is an alkaline phosphatase from Escherichia coli, and is one of the most active alkaline phosphatases. Alkaline phosphatase from Escherichia coli reduces myeloperoxidase activity and bacterial translocation. Alkaline phosphatase from Escherichia coli improves survival rate of mice infected with E. coli. Alkaline phosphatase from Escherichia coli improves TNBS-induced colon inflammation.

Orthophosphoric monoester + H₂O → Alcohol + H₃PO₄

Properties

Molecular weight: 80 kDa (Sephadex G–200)

Isoelectric point: pH 4.5

Optimum pH: 9.0                                    Figure 1

pH stability: 8.5–10.0 (37°C, 60 min)                                  Figure 2

Thermal stability: Stable at 45°C and below (pH 9.0, 10 min) Figure 3

Storage stability: At least one year at −20°C                      Figure 4

Activators: Na⁺, Mg²⁺

Applications

This enzyme is useful for enzymatic determination of lecithin when coupled with phospholipase C and choline oxidase. 

 


Assay
■ Principle
The assay is based on the increase in absorbance at 420 nm as p-nitrophenol is liberated according to the following reaction:
■ Unit definition

One unit is defined as the amount of enzyme which liberates 1 μ mole of p-nitrophenol per minute at 37℃ under the conditions specified in the assay procedure.

■ Reagents

1. Reaction mixture 

0.5 M Tris–HCl buffer pH 9.0                                0.20 ml 

10 mM p-nitrophenylphosphate solution    0.20 ml 

4 M NaCl solution               1.00 ml 

Distilled water                  0.50 ml

2. Reaction stopper

0.5 N NaOH solution

3. Enzyme dilution buffer 

50 mM Tris–HCl buffer pH 9.0

■ Enzyme solution
Accurately weigh about 20 mg of the sample and add enzyme dilution buffer to make a total of 20 ml. Dilute it with enzyme dilution buffer to adjust the concentration as required.
■ Procedure

1. Pipette accurately 1.90 ml of reaction mixture into a small test tube and preincubate at 37℃.

2. After 5 min, add exactly 100 μl of enzyme solution and mix to start the reaction at 37℃.

※ In the case of a test blank, add 100 μl of enzyme dilution buffer in place of enzyme solution.
3. At 10 minutes after starting the reaction, add 1.0 ml of the reaction stopper to stop the reaction.
4. Measure the absorbance at 420 nm.  
Absorbance 
sample : As       
blank : Ab  
△A = (As − Ab) ≦ 0.50 Abs
■ Calculation
14.1 : millimolar extinction coefficient of p-nitrophenol at 420 nm (cm²/μ mole)
10 : reaction time (min)
3.00 : final volume (ml)
0.10 : volume of enzyme solution (ml)
X : concentration of the sample in enzyme solution (mg/ml)

规格

产品名称
碱性磷酸酶 (ALP)
别名
碱性磷酸酯酶 | 碱式磷酸酶 | 碱性磷酸单酯酶 | 正磷酸单酯磷酸水解酶 | 磷酸单酯水解酶(碱性)
英文别名
Orthophosphoric-monoester phosphohydrolase (alkaline optimum) | alkaline phosphatase | alkaline phosphomonoesterase | glycerophosphatase | phosphomonoesterase | Intestinal-type alkaline phosphatase | ALPI | phoA | ECK0378 | psiA
规格或纯度
生物活性, ActiBioPure™, 天然, 高性能, EnzymoPure™, 来源于大肠杆菌; ≥40 U/mg enzyme powder
生化机理
碱性磷酸酶 (Alkaline phosphatase),来源于大肠杆菌,是一种主要存在于周质空间的二聚体、非糖基化蛋白质。已知存在三种亚型。这种酶需要锌,并被镁激活。大肠杆菌含皂碱磷酸酶对磷酸酯具有广泛的特异性。碱性磷酸酶是研究磷酸酯酶的模型酶。用于各种生化方法和酶联免疫吸附试验 (ELISA)。
生物活性
≥40 U/mg enzyme powder
种属
大肠杆菌(E.coli)
来源
天然
预测分子量
80 kDa
CAS编号和信息
9001-78-9
酶学委员会编号
EC 3.1.3.1
分子类型
酶
产品线
生物产品
储存与运输
物理形态
冻干(Lyophilized)
浓度
来源于大肠杆菌; ≥40 U/mg enzyme powder
复溶
Reconstitute in 50 mM Tris–HCl buffer pH 9.0 to a concentration of 1mg/ml.
储存条件
-20°C储存,避免反复冻融
运输条件
超低温运输
稳定性与储存
长期储存-20℃;复溶后建议分装,避免反复冻融。
单位定义
One unit is defined as the amount of enzyme which liberates 1 μmole of p –nitrophenol per minute at 37℃ under the conditions specified in the assay procedure.

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批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ26F0939322 分析证书 P755408
ZJ26F0939321 分析证书 P755408
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