计算溶液所需的质量、体积或浓度。
BioReagent,分子生物学级,无菌 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
2-8°C储存。低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
UltraBio™293F 转染试剂是 阿拉丁专门正对 HEK293,HEK293T,HEK293FT 等细胞研发的高性能阳离子聚合物转染试剂。UltraBio™293F 转染试剂对 HEK293 系列细胞,可实现高效、高重复性的细胞转染。UltraBio™293F兼具优异的阳离子聚合物/DNA 复合物形成能力和转染到细胞内 DNA 的快速释放能力,保证了优异的转染性能和极低的细胞毒性。
储存方式
2-8ºC 保存。
使用说明
操作前注意事项
1. 质粒:建议选用无内毒素的高质量质粒。质粒中的内毒素会导致转染效率显著下降,推荐使用无内毒素质粒抽提试剂盒进行质粒提取,保证质粒 A260/A280 比值在 1.8-2.0 之间,浓度不低于 500 ng/μL。
2. 细胞:建议在进行转染实验时,尽量使用传代次数较少的细胞。如果细胞是刚复苏的,最好先传两代,以确保细胞状态稳定。转染应在细胞传代后 12-24 小时内进行,此时细胞密度应在 70%-80%之间。避免细胞受到细菌、真菌或支原体等污染,因为细胞状态会直接影响转染效率。
3. 由于血清会影响质粒转染试剂复合物的形成,转染时抗生素会影响细胞的状态,因此在准备转染复合物时需用无血清无抗生素培养基稀释 DNA 及转染试剂。
4. 转染试剂与 DNA 核酸用量比例范围为:每 1 μg DNA 使用 1.5~4 μL 体积的UltraBio™293F转染试剂。
5. 本产品仅用于科研,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作步骤
转染操作(以 6 孔板和 293T 细胞为例为例):
1. 接种准备转染的细胞:
1.1 转染前一天,将 293T 细胞接种至细胞培养皿中培养,转染时细胞密度在 70%~80%为宜。
2. 细胞转染:
2.1 质粒稀释:取 100 μL 无血清无抗生素的培养基(如 Opti-MEM 等)稀释 2 μg DNA,轻轻混匀;
2.2 转染试剂稀释:取 100 μL 无血清培养基加入 6 μL 的 Cyto293™ Transfection Reagent 转染试剂,轻轻混匀;
2.3 DNA-转染试剂复合物:将转染试剂稀释液逐滴滴加到质粒 DNA 稀释液中,轻轻混匀,室温静置 10 min,形成 DNA-转染试剂复合物。
2.4 在形成复合物的过程中,需要移除细胞生长培养基,并在每孔中加入 2 mL 新鲜预热的不含抗生素含有血清的培养基。将 DNA 转染试剂复合物缓缓滴加到 293T 细胞中,随后轻轻混匀,置于培养箱中培养。待合适时间点进行转染结果的检测。
不同培养皿/瓶推荐试剂用量
培养器皿 | 表面积(cm2) | DNA 用量(μg) | 转染试剂用量(μL) | 稀释液体积(μL) | 培养基用量(mL) |
96 well | 0.3 | 0.1 | 0.1 | 10 | 0.1 |
48 well | 0.7 | 0.2 | 0.3 | 20 | 0.2 |
24 well | 1.9 | 0.5 | 1 | 50 | 0.5 |
12 well | 3.8 | 1 | 2 | 50 | 1 |
6 well | 10 | 2 | 4 | 100 | 2 |
25 cm2 Flask | 21 | 4 | 8 | 200 | 4 |
75 cm2 Flask | 58 | 10 | 20 | 500 | 10 |
试剂用量
T751605-1ml:~1,000 次,1 μL/well,24 wells
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| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
| 分析证书 | T751605 |
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