计算溶液所需的质量、体积或浓度。
纤维素酶活性检测试剂盒 (新亚铜试剂, 微量法)
有货
为什么选择此级别
BioReagent,标曲法 级 ，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
储存与运输
2-8°C储存,避光。低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
质量文档
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
文献证明
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
概述
纤维素酶（EC 3.2.1.4）是一类由微生物（如放线菌、细菌、真菌）以及部分动物产生的、能够协同作用于纤维素聚合物并将其降解为还原糖的多酶体系。纤维素酶的活性检测在多个研究领域中具有重要应用，尤其广泛应用于环境微生物学、土壤生态学、植物病理学及生物质能源开发等领域。
例如，在腐殖土壤中，纤维素酶的活性可反映有机物的分解程度与微生物代谢活力；在衰老或腐败的植物组织中，纤维素酶活性常显著升高，是评估植物组织老化、病害侵染及降解程度的关键指标。
本试剂盒检测原理是纤维素酶催化底物水解纤维素释放葡萄糖、纤维二糖、纤维寡糖等还原糖。还原糖可将Cu (II)-新亚铜试剂络合物转化为亮橙色的 Cu (I)-新亚铜试剂络合物。通过 450 nm 处吸光度的大小来测定纤维素酶的活性。
组分表
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*请在实验前检查各组分的量。
*各组分在规格基础上额外提供 10%的量用于进行标准曲线制作或预实验。
自备仪器与试剂
| 自备资源类型 | 资源名称 | 备注 |
| 仪器 | 酶标仪 | 能测 450 nm 处的吸光度 |
| 耗材 | 96 孔酶标板 | 普通透明板 |
| 试剂 | 去离子水 | 标准品稀释用 |
| 其他 | 匀浆器、30~50 目筛网、水浴锅/金属浴、恒温箱、冰 盒、低温离心机、可调节式移液枪及枪头 | 检测量较大时合理使用多通道移液器有 助于提高实验效率 |
注意事项
1.正式检测前，建议选择 2-3 个预期差异较大的样本进行预实验。
2.建议实验者自行建立标准曲线以提高结果准确度。如未自行建立标准曲线，可参考结果展示部分的典型标准曲线公式进行结果计算。
3.生化检测试剂普遍具有刺激性、生物毒性等，为了您的安全和健康，请在实验全程做好生物安全防护，穿戴实验服、口罩、手套、头套等安全护具，在通风橱、生物安全柜中进行实验。
4.本产品仅供科学研究使用，不适用于临床诊断。
试剂准备
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标准品配制
使用 2 mmol/L 标准品溶液，按照下表所示进行稀释。每次实验都要做一次标准品检测，制作标曲。
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样本制备
注意：建议使用新鲜样本。如果不能当天提取，则把分装的土壤样本保存在-80℃，一个月内使用。当准备好进行该项实验时，将样本从-80℃拿出后，在冰上解冻。但是请注意，这可能会影响样本的稳定性，实验结果可能会低于预期。
1.土壤样本：新鲜土壤样本自然风干或 37℃烘箱风干，过 30~50 目筛。按照土壤质量(g)：Reagent Ⅰ体积(mL)为 1：9 的比例，每 0.1 g 土壤样本加入 0.9 mL Reagent Ⅰ，冰浴匀浆。4℃，12000 g 离心 10 min，取上清，置于冰上待测。
2.腐败/衰老植物样本：称取 0.1 g 组织样本，按照组织质量(g)：Reagent Ⅰ体积(mL)为 1：9 的比例，加入0.9 mL Reagent Ⅰ，冰浴匀浆。4℃，12000 g 离心 10 min，取上清，置于冰上待测。
实验步骤
注意：糖化液略黏稠，吸取加入 96 孔板前建议润洗枪头，缓慢加入确保加入体积准确。沸水浴可用金属浴替代，
确保温度达到 100℃即可。
1. 酶标仪准备：预热 30 min 以上，调节波长到 450 nm。
2. 工作液的配制：临用前配制，按照每孔配制 150 μL 工作液，现配现用，避光保存。吸取 50 μL Reagent Ⅲ和50 μL Reagent Ⅳ混匀，然后加入 50 μL Reagent Ⅴ混匀，配制体积比 1：1：1。禁止调换工作液配制时试剂加入顺序。
3. 检测体系配制：在 EP 管/拧盖离心管中按照如下方式操作。
充分混匀后，50℃水浴 1 h。孵育结束后，将上述 EP 管放入沸水中煮沸 15 min，流水冷却至室温后，12000 g 室温离心 10 min，取上清（糖化液）混匀待测。下述操作在 96 孔板中操作：
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4. 吸光度检测：充分混匀，37℃孵育 40 min，测定 450 nm 处吸光值，分别标记为 A空白 、A标准、A测定、A对照
结果计算
1. 数据处理
计算 ΔA标准 = A标准 - A空白，ΔA测定 = A测定 - A对照。
2. 标准曲线绘制
以标准品浓度为 y 轴，ΔA标准 为 x 轴，绘制标准曲线。将 ΔA测定 代入方程得到 y 值（mmol/L）。
3. 样本纤维素酶活性计算 -按样本质量计算 酶活性单位的定义：
每克样本每分钟催化生成 1 μg 葡萄糖定义为 1 个酶活单位，单位为 U/g。
纤维素酶活性(U/g) = (y × V反总 × 180.16) ÷ (W × V样 ÷ V样总) ÷ T = y × 13.512 ÷ W
-参数说明：
VV样总：加入 Reagent Ⅰ 的总体积，0.9 mL；
VV样：上样体积，0.04 mL；
VV反总：酶促反应总体积，0.2 mL；
W：样本质量，g；
T：酶促反应时间，60 min；
180.16：葡萄糖微摩尔质量 μg/μmol。
结果展示
典型标准曲线：y=0.8079x+0.0087，R²=0.9994
示例-1：取 0.1 g 土壤样本，按照测定步骤操作，用 96 孔板进行检测。测得ΔA测定=A测定 - A对照=0.271-0.179=0.092，代入标准曲线，计算 y＝0.083。按照样本质量计算得：纤维素酶活性（U/g）=y×13.512÷W=11.215 U/g
FAQ
检测得到的样本ΔA测定过高或者过低怎么办？
如果样本的ΔA测定高于 1 mmol/L 标准品的ΔA标准，则说明样本中纤维素酶活性较高，需用试剂Ⅰ适当稀释，
再重新进行测定。如果样本的ΔA测定＜0.01，可适当提高样本量（土壤和腐败/衰老植物组织克重），或者减少试剂Ⅰ用量，再重新进行测定。
Cellulase (EC 3.2.1.4) is a multi‑enzyme system produced by microorganisms (e.g., actinomycetes, bacteria, fungi) and some animals. Its components act synergistically on cellulose polymers, progressively degrading them into reducing sugars, including glucose, cellobiose, and cello‑oligosaccharides. Assays for cellulase activity are widely used in environmental microbiology, soil ecology, plant pathology, and biomass energy development. In humus‑rich soils, cellulase activity effectively reflects the progress of organic matter decomposition and microbial metabolic activity. In senescent or diseased plant tissues, its activity increases significantly, serving as an important indicator for assessing plant tissue aging, pathogen infection, and the degree of degradation. This kit employs a copper reduction colorimetric method (the neocuproine method). The detection principle is as follows: cellulase catalyzes the hydrolysis of the substrate, and the released reducing sugars reduce the Cu(II)‑neocuproine complex to the bright orange Cu(I)‑neocuproine complex. By measuring the change in absorbance of the reaction system at 450 nm, cellulase activity can be quantitatively determined. This method features high sensitivity, strong resistance to interference, and is suitable for high‑throughput micro‑scale detection applications. This reagent is intended for research use only and is not suitable for clinical diagnosis or other applications.
规格
别名
纤维素酶活性检测试剂盒 | 内切‑β‑1,4‑葡聚糖酶活性检测试剂盒
英文别名
Cellulase (CL) Assay Kit | Endo‑1,4‑β‑D‑glucanase Activity Assay Kit
规格或纯度
BioReagent, 标曲法
英文名称
Cellulase Activity Assay Kit (Neocuproine, Micro Method)
应用
酶活性检测
检测方法
分光光度法
检测仪器
酶标仪
检测波长
450nm
敏感性
Light Sensitive
储存与运输
储存条件
2-8°C储存,避光
运输条件
低温运输
稳定性与储存
Store at 2-8℃ long term (24 months).
组分与储存
| 组分货号 | 组分名称 | 物理外观 | 48T | 96T | 储存 |
| C1527444A | 试剂 I | 液体 | 60 mL | 120 mL | 2-8℃. |
| C1527444B | 试剂 II | 液体 | 6 mL | 12 mL | 2-8℃, 避光保存 |
| C1527444C | 试剂 III | 液体 | 4 mL | 8 mL | 2-8℃, 避光保存 |
| C1527444D | 试剂 IV | 液体 | 5 mL | 10 mL | 2-8℃, 避光保存 |
| C1527444E | 试剂 V | 液体 | 4 mL | 8 mL | 2-8℃. |
| C1527444F | 标准品 | 液体 | 2 mL | 2 mL | 2-8℃. |
技术文档
高级数据
质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
输入批号以搜索分析图谱:
技术文档和文章
溶液计算器
常见问题
什么是「BioReagent」？
「BioReagent」表示该产品经过加工和检测，适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性，以及在相关情况下的生物活性验证。
本产品应如何储存？
请于2–8 °C、避光条件下保存。本品对光敏感，请保存在原始的避光或棕色容器中。
如何获取批次专用COA？
每个订单都会随附分析证书（COA），您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA，请联系您的客户代表，或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。
本产品如何运输？
本产品采用湿冰冷藏运输。收货后请立即拆包，并按上述储存条件保存。
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