BioReagent 级 ，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
2-8°C储存,禁止冷冻。低温运输,禁止冷冻 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
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在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
UltraBio™ GST标签蛋白纯化琼脂糖磁珠以一步纯化各种表达系统表达的谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽转移酶的重组衍生物。 同时，利用重组技术将诱饵蛋白与GST（Glutathione S transferase）标签融合，重组融合蛋白通过亲和作用与UltraBio™ GST标签蛋白纯化琼脂糖磁珠结合，当目标蛋白与固相载体混合时，就可被诱饵蛋白吸附，在磁力下，目标蛋白就从表达体系中分离出来，使用UltraBio™ GST标签蛋白纯化琼脂糖磁珠进行GST Pull-down实验，操作简单、快捷，是传统方法无法比拟的。
本产品每毫升磁珠悬浊液含约20% v/v琼脂糖磁珠沉淀。
包装规格： 20% v/v悬液
| 参数 | 指标 |
| 基质 | 磁性琼脂糖微球 |
| 配基 | Glutathione（谷胱甘肽） |
| 含量 | Slurry: 20% |
| 粒径 | 30-100 μm |
| 载量 | 5-10 mg GST 融合蛋白/mL (100%, v/v) |
| 保存 | 2-8℃ (含20% 乙醇的1×PBS ） |
使用说明：
一、蛋白纯化操作流程
1、缓冲液准备
平衡/洗杂液：PBS, pH7.4 (140mM NaCl, 2.7mM KCl, 10mM Na₂HPO₄, 1.8mM KH₂PO₄, pH7.4)
洗脱液：50mM Tris-HCl, 10-20 mM 还原型谷胱甘肽, pH8.0
2、样品准备
样品在上样前建议离心或用0.22μm或0.45μm滤膜过滤，减少杂质，提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。
2.1 细菌或酵母表达的蛋白
(1) 挑取单菌落到培养基中，根据载体使用说明，加入相应浓度的诱导剂诱导相应的时间。
(2) 表达结束后，将培养液转移到离心杯中，7000rpm (7500×g)，离心15min收集菌体，然后按照菌体：平衡液=1：10（W/V）加入平衡液，加入终浓度为1mM的PMSF。加入溶菌酶（工作浓度为0.2-0.4mg/ml，如果表达的宿主细胞内含pLysS 或pLysE，可以不加溶菌酶），（同时也可加入其他蛋白酶抑制剂，但不能影响目的蛋白与填料的结合）。
(3) 将菌体沉淀悬浮起来，（如果菌液浓度高，也可考虑加入10μg/ml RNaseA和5μg/ml DNaseI），混匀，放置于冰上，然后冰上超声 破碎细胞，至菌液基本保持澄清。
(4) 将澄清的破碎液转移至离心管中，10000rpm (15000×g)，4℃离心20-30min。取上清，置于冰上备用或-20℃保存。
2.2 酵母、昆虫和哺乳细胞分泌表达可溶性蛋白
(1) 将细胞培养液转移至离心杯，5000rpm (3800×g)，离心10min，收集菌体得上清，即可直接加入柱子使用。
(2) 对于大量体积的上清，需加入硫酸铵沉淀浓缩后，蛋白还需用平衡液透析后才能加入柱子。
3、磁珠准备
3.1 根据产品性能指标准备适量的UltraBio™ GST标签蛋白纯化琼脂糖磁珠（磁珠体积为总体积的20%），将磁珠反复颠倒，充分混匀，使用移液器取适量的磁珠悬浮液，置于离心管中，将离心管置于磁分离器上，大约1min，待溶液变澄清后，用移液器吸弃清液。
3.2 磁珠平衡：将离心管从磁分离器上取下来，加入与悬浮液等体积的平衡液，使用枪头反复吹打5次，将离心管置于磁分离器上，大约1min，待溶液变澄清后，用移液器吸弃清液，重复洗涤2次。
4、标签蛋白纯化
4.1 将GST融合蛋白裂解液加入到处理好的磁珠中，反复颠倒混匀。将离心管置于混合仪上，室温孵育30min以上（具体时间根据结合效果调整）。
4.2 磁珠洗杂：将离心管置于磁分离器，大约1min，待溶液变澄清后，用移液器移出上清液，保留，以备取样检测。向离心管中加入5倍悬浮液体积的洗杂液，使用枪头反复吹打5次，将离心管置于磁分离器上，大约1min，待溶液变澄清后，用移液器吸弃上清液。至少重复上述步骤2次。
4.3 洗脱目标蛋白：在上述离心管中加入3-5倍磁珠体积的洗脱液，用移液器吹打5次， 然后在室温下置于翻转混合仪或者手工轻轻翻转离心管，5-10min后，置于磁分离器上，大约1min，待溶液变澄清后，吸取上清液，收集洗脱组分，即为目标蛋白。重复操作两次，分别收集洗脱组分，留待检测。
4.4 磁珠保存：使用后的磁珠用1ml洗脱液重悬磁珠，然后置于磁分离器上，大约1min，待溶液变澄清后，吸弃上清液。该操作重复两次。再加入1ml平衡液，悬浮磁珠，然后置于磁分离器上，大约1min，待溶液变澄清后，吸弃上清液。再加入4倍磁珠体积的20%乙醇，置 于2-8℃保存。
二、Pull-Down操作流程
1、缓冲液准备
平衡/洗杂液：PBS, pH7.4 (140mM NaCl, 2.7mM KCl, 10mM Na₂HPO₄, 1.8mM KH₂PO₄, pH7.4 )
洗脱液：50mM Tris-HCl, 10mM 还原型谷胱甘肽, pH8.0
2、Pull-Down操作
2.1 磁珠准备
根据产品性能指标准备适量的UltraBio™ GST标签蛋白纯化琼脂糖磁珠（磁珠体积为总体积的20%），将磁珠反复颠倒，充分混匀，使用移液器取适量的磁珠悬浮液，置于离心管中，将离心管置于磁分离器上，大约1min，待溶液变澄清后，用移液器吸弃清液。
2.2 磁珠平衡
再将离心管磁分离器上取下来，加入与悬浮液等体积的平衡液，使用枪头反复吹打5-10次，将离心管置于磁分离器上，大约1min，待溶液变澄清后，用移液器吸弃清液，重复洗涤2次。
2.3 磁珠结合诱导蛋白
将含有GST标签的诱饵蛋白样品加入到处理好的磁珠中，颠倒混匀。将离心管置于混合仪上，室温孵育30min以上（具体时间根据结合效果调整）。
2.4 磁珠洗杂
将离心管置于磁分离器，大约1min，待溶液变澄清后，用移液器移出上清液，保留，以备取样检测。向离心管中加入5倍悬浮液体积的洗杂液，使用枪头反复吹打5-10次，将离心管置于磁分离器上，大约1min，待溶液变澄清后，用移液器吸弃上清液。重复上述步骤2次。 即得到诱饵蛋白-磁珠复合物。
2.5 目标蛋白与诱饵蛋白-磁珠复合物的结合
将含有目标蛋白的样品加入到处理好的靶蛋白-磁珠复合物中，颠倒混匀。将离心管置于混合仪上，室温孵育30min以上（具体时间根据结合效果调整）。
2.6 磁珠洗杂
将离心管置于磁分离器，大约1min，待溶液变澄清后，用移液器移出上清液，保留，以备取样检测。向离心管中加入5倍悬浮液体积的洗杂液，使用枪头反复吹打5-10次，将离心管置于磁分离器上，大约1min，待溶液变澄清后，用移液器吸弃上清液。重复上述步骤2次。 目标蛋白通过与靶蛋白的结合，从混合体系中被捕获。
2.7 目的蛋白的洗脱
在上述离心管中加入3-5倍磁珠体积的洗脱液，用移液器吹打5次，然后在室温下置于翻转混合仪或者手工轻轻翻转离心管，5-10min后， 置于磁分离器上，大约1min，待溶液变澄清后，吸取上清液，收集洗脱组分，即得到靶蛋白和目标蛋白复合物。再重复操作两次，分别收集洗脱组分，留待检测。
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| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
 ZJ26F0636390 |
分析证书 | M751555 |
| ZJ25F0926630 |
分析证书 | M751555 |
| ZJ25F0926629 |
分析证书 | M751555 |
危险品化学品经营许可证（带存储）