重组谷氨酸脱氢酶(NAD-GDH)

CAS: 9001-46-1 货号: R1505822 EC号: 232-607-3
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级别和纯度: 生物活性 ? 生物活性级(Bioactive)—— 经验证在功能检测中保持生物活性。当分子须具有功能活性而不仅是纯度时使用。 重组 ? 重组(Recombinant)—— 通过重组表达生产,序列确定、批次稳定。适用于来源明确、无动物源的可重现蛋白。 ActiBioPure™ ? ActiBioPure™ —— 阿拉丁面向生物活性和重组产品的优质系列。当同时需要高纯度和保持生物活性时使用。 高性能 ? 高性能级 —— 纯度和性能特性经过优化。适用于普通等级无法满足的灵敏分析。 EnzymoPure™ ? EnzymoPure™ —— 阿拉丁的高质量酶解决方案系列。当酶纯度和明确活性决定检测或工艺性能时使用。 ≥80 U/mg enzyme powder
Accession #
P24295
生物活性
≥80 U/mg powder
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规格
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R1505822-1KU
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¥399.90
5KU
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为什么选择此级别

ActiBioPure™,EnzymoPure™,生物活性,重组,高性能 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述


Glutamate dehydrogenase is an enzyme in both prokaryotes and eukaryotic mitochondria. Glutamate dehydrogenase can be used for the enzymatic determination of ammonia, alpha-ketoglutaric acid, L-glutamate and urease.

Application

This enzyme can be used for the enzymatic determination of NH₃, α-ketoglutarate, and L-glutamic acid, and also for the activity detection of leucine aminopeptidase and urease; in clinical analysis, by coupling with urease, it can also be used for the enzymatic determination of urea.

Assay procedure  

Principle

The disappearance of NADH is measured at 340nm by spectrophotometry. 

Unit definition

One unit (U) is defined as the amount of enzyme which produces one micromole of NAD⁺ per minute at 25℃ and pH 7.3.

Reagents

A. Potassium phosphate buffer, 50mM, pH7.4:Mix 50Mm KH₂PO₄ solution and 50mM K₂HPO₄ solution to make a pH7.4 solution.
B. Imidazole-HCl buffer, 58mM, pH7.3:Dissolve 3.95g of imidazole in 800ml of distilled water, adjust to pH7.3 with 2N HCl and dilute with distilled water to 1000ml.
C. α-Ketoglutarate solution, 0.13M, pH6.0~7.0:Dissolve 475mg of α-ketoglutarate in 8ml of distilled water, adjust to between pH6.0 and 7.0 with 2N NaOH and dilute with distilled water to 25ml.
D. NADH solution, 4mM:14mg of NADH.2Na, (MW=709.4) /5ml of 5mM Potassium phosphate buffer, pH7.4.
E. Ammonium acetate(1.6M)-EDTA(4mM) solution: Dissolve 1.23g of ammonium acetate and 14.9mg of EDTA.2Na in 8ml of distilled water and dilute with distilled water to 10ml.F. Enzyme dilution buffer:Imidazole-HCl buffer(Reagent B) containing 0.1% bovine serum albumin(BSA).
Sample: Dissolve up to 5mg of the lyophilized enzyme/ml in ice-cold potassium phosphate buffer(Reagent A).
Dissolve the enzyme solution to a volume activity of 0.20~0.30U/ml with ice-cold enzyme dilution buffer (Reagent F) immediately before measurement.
Procedure

1. Pipette the following reagents into a cuvette (light path:1cm).2.4ml Imidazole-HCl buffer (Reagent B)0.3ml α-Ketoglutarate solution (Reagent C)0.1ml NADH solution (Reagent D)0.1ml Ammonium acetate-EDTA solution (Reagent E)

2. Equilibrate at 25℃ for about 5 min.

3. Add 0.1ml of sample and mix.

4. Record the decrease of absorbance at 340nm in a spectrophotometer thermostated at 25℃,and calculate the ΔA per min using the linear portion of the curve (ΔAₛ).The blank solution is prepared by adding enzyme dilution buffer(Reagent F) instead of sample(ΔA₀).

Calcuation 

Activity can be calculated by using the following formula:

 

Vt:Total volume (3.00ml)
Vs:Sample volume (0.1ml)
6.22:Millimolar extinction coefficient of NADH under the assay condition(cm²/μmol)
1.0:Light path length(cm)
df:Dilution factor
C:Enzyme concentration in dissolution(c mg/ml)

规格

产品名称
重组谷氨酸脱氢酶(NAD-GDH)
别名
谷氨酸脱氢酶(NAD 依赖型)
英文别名
GLDH | L-GLDH | L-Glutamate Dehydrogenase | Glutamate Dehydrogenase (NAD-dependent) | glutamic dehydrogenase | NAD-glutamate dehydrogenase | GDH
规格或纯度
生物活性,重组,ActiBioPure™,高性能,EnzymoPure™,≥80 U/mg enzyme powder
生化机理
The enzyme appears in viruses and cellular organisms.
生物活性
≥80 U/mg powder
来源
重组表达
CAS编号和信息
9001-46-1
酶学委员会编号
EC 1.4.1.2
分子类型
酶
产品线
生物产品
储存与运输
物理形态
冻干(Lyophilized)
浓度
≥80 U/mg enzyme powder
复溶
Reconstitute in 50mM Potassium phosphate buffer, pH7.4.
储存条件
-20°C储存,避免反复冻融
运输条件
超低温运输
稳定性与储存
长期储存-20℃(24个月);复溶后建议分装,避免反复冻融。
单位定义
1个酶活单位等于在在pH7.3和25°C条件下1分钟生成1微摩尔NAD⁺的酶量。

技术文档

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批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ26F0130796 分析证书 R1505822
ZJ26F0130795 分析证书 R1505822
ZJ26F0130797 分析证书 R1505822
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溶液计算器

常见问题

什么是「生物活性」?
「生物活性」表示该产品经过加工和检测,适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性,以及在相关情况下的生物活性验证。
什么是「重组」?
「重组」是一个明确定义的分析纯度级别,适用于需要特定验证属性的工作流程。它规定了最低含量百分比、对常见杂质(水分、重金属、灼烧残渣)的受控限值,以及批间一致性。「重组」是几个纯度级别之一——请根据方法的灵敏度和监管要求进行选择。
本产品应如何储存?
请于?20 °C条件下保存。避免反复冻融。建议按单次用量分装保存。
本产品如何运输?
本产品采用保温箱配冰袋运输。收货后请立即拆包,并按上述储存条件保存。
本产品的 CAS 号、分子式和分子量是多少?
本产品的 CAS 号为 9001-46-1。
如何获取批次专用COA?
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