肌酸脒基水解酶(CR)

CAS: 37340-58-2 货号: rp216175 分子量: ~100 kDa EC号: 253-471-1
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级别和纯度: 重组 ? 重组(Recombinant)—— 通过重组表达生产,序列确定、批次稳定。适用于来源明确、无动物源的可重现蛋白。 BioReagent ? 生物试剂级(BioReagent)—— 经测试适用于生命科学和分子生物学。适用于需要生物相容性的细胞培养、检测和生化工作。 ActiBioPure™ ? ActiBioPure™ —— 阿拉丁面向生物活性和重组产品的优质系列。当同时需要高纯度和保持生物活性时使用。 高性能 ? 高性能级 —— 纯度和性能特性经过优化。适用于普通等级无法满足的灵敏分析。 EnzymoPure™ ? EnzymoPure™ —— 阿拉丁的高质量酶解决方案系列。当酶纯度和明确活性决定检测或工艺性能时使用。 ≥90%(SDS-PAGE) ≥5.8 U/mg enzyme powder
Accession #
P38488
生物活性
≥5.8 U/mg enzyme powder
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规格
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为什么选择此级别

ActiBioPure™,BioReagent,EnzymoPure™,重组,高性能 级 提供 ≥90%(SDS-PAGE) 纯度,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 2 篇同行评审文献引用。

概述

分子量: 48 kDa 
酶学委员会编号: EC 3.5.3.3
物理外观:Lyophilized powder  
水解肌酸,用于酶法肌酐试剂的研发和大量配制。 
酶学性质
来源:                     微生物
酶学委员会编号: EC 3.5.3.3
分子量:                 48 kDa (SDS-PAGE)
等电点:                 4.6
Km值:                   8.81×10-3M(Creatine)

抑制剂:                 Ag ⁺ ,Cu²⁺,Hg²⁺
最适pH:                8.0                                             图1
最适温度:             45℃                                          图2
pH稳定性:           4.5-10.0(25°C,16h)                  图3
热稳定性:            50°C以下稳定(pH7.5,30min) 图4
保护剂:                 EDTA及糖类物质

活性测定方法 

1、原理 

2、酶活定义
单位酶活定义为在下述条件下,每分钟催化反应生成1 μmol肌酸完全转化为肌氨酸所需的酶量。

3、试剂准备

试剂I:0.1M肌酸溶液。

试剂II:将2.0g DAB溶解在100mL二甲亚砜中,并加入15mL浓盐酸。

酶稀释液:50mMPBS,pH7.5,样品用酶稀释液将酶稀释至2.0-3.0U/mL。

4、操作步骤

1.取1mL试剂I于5mL EP管中,37°C预热5min。

2.加入0.1mL酶液,混匀。

3.37°C水浴反应10min后,加入2.0mL试剂II终止反应,并在25°C放置20min。

4.使用紫外分光光度计,测定反应液在435nm处吸光度值。

5.酶稀释液代替酶液作为空白对照。

5、 活力计算


3.1:反应液总体积(mL);

0.1:酶液体积(mL);

10:反应时间(min);

1.0:光路长度(cm);

df:稀释倍数;

C:酶浓度(mg/mL);

0.321:黄色染料在435nm处毫摩尔吸光系数(cm²/μmol)。

Molecular weight: 48 kDa 
Enzymology Committee Number: EC 3.5.3.3
Physical appearance: Lyophilized powder 

Hydrolyzed creatine, used in the development and mass formulation of enzymatic creatinine reagents.
Enzymatic properties 
Source: Microorganism
Enzymology Committee No. : EC 3.5.3.3
Molecular weight: 48 kDa (SDS-PAGE)
Isoelectric point: 4.6
Km value: 8.81×10-3M(Creatine)

Inhibitors: Ag⁺ , Cu²⁺, Hg²⁺
Optimal pH: 8.0                                                                 图1
Optimum temperature: 45℃                                           图2
pH stability: 4.5-10.0(25°C,16h)                                     图 3
Thermal stability: Stable below 50°C (pH7.5,30min)  图 4
Protective agents: EDTA and sugar



Assay method for activity
1. Principle

Urea (Urea) and DAB (rho - dimethylaminobenzaldenhyde) reaction to form the yellow dye amount shall be tested by spectrophotometer at 435 nm.
2. Definition of enzyme activity
Unit enzyme activity is defined as the amount of enzyme required to catalyze a reaction to produce 1 μmol of creatine per minute for complete conversion to sarcosine under the following conditions.
3. Reagent preparation
Reagent I: 0.1M creatine solution.
Reagent II: 2.0gDAB was dissolved in 100mL dimethyl sulfoxide and 15mL concentrated hydrochloric acid was added.
Enzyme diluent: 50mMPBS, pH7.5, enzyme diluent was used to dilute the sample to 2.0-3.0U/mL.

4. Operation procedure
1. Take 1mL reagent I and preheat it in 5mLEP tube at 37°C for 5min.
2. Add 0.1mL of enzyme liquid and mix well.
3. After 10min reaction in a water bath at 37°C, 2.0mL reagent II was added to terminate the reaction and placed at 25°C for 20min.
4. Use an ultraviolet spectrophotometer to determine the absorbance value of the reaction liquid at 435nm.
5. Enzyme diluent was used as blank control instead of enzyme liquid.

5. Vitality computing

3.1: total volume of reaction liquid (mL);
0.1: enzyme liquid volume (mL);
10: Reaction time (min);
1.0: optical path length (cm);
df: dilution ratio;

C: Enzyme concentration (mg/mL);
0.321: millimolar absorption coefficient of yellow dye at 435nm (cm²/μmol).

规格

产品名称
肌酸脒基水解酶(CR)
规格或纯度
重组,BioReagent,ActiBioPure™,高性能,EnzymoPure™,≥90%(SDS-PAGE),≥5.8 U/mg enzyme powder
生物活性
≥5.8 U/mg enzyme powder
来源
重组表达
CAS编号和信息
37340-58-2
酶学委员会编号
EC 3.5.3.3
分子类型
酶
产品线
生物产品
储存与运输
物理形态
冻干(Lyophilized)
浓度
≥5.8 U/mg enzyme powder
复溶
Reconstitute in 50mM PBS, pH7.5.
储存条件
-20°C储存,避免反复冻融
运输条件
超低温运输
稳定性与储存
长期储存-20℃(18个月);复溶后建议分装,避免反复冻融。
单位定义
在下述条件下,每分钟催化反应生成1 μmol肌酸完全转化为肌氨酸所需的酶量。

技术文档

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高级数据

质检证书(CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
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批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ25F0521345 分析证书 rp216175
ZJ25F0421103 分析证书 rp216175
技术文档和文章
肌酐酶法检测的反应原理、方法体系与结果质量控制
Creatininase-Based Creatinine Detection: Reaction Principles, Method Systems, and Result Quality Control
肌酐含量检测的主要方法、反应原理与结果控制
Creatinine Content Detection: Main Methods, Reaction Principles, and Result Control
肌酐代谢相关酶的催化机制及其在肾功能检测中的应用
Catalytic Mechanisms of Creatinine Metabolism-Related Enzymes and Their Applications in Renal Function Testing
此产品的引用文献
溶液计算器

常见问题

本产品的纯度是多少?如何测定?
本产品的纯度为 ≥90%,采用SDS-PAGE测定。批次的具体数值以分析证书(COA)为准。
什么是「重组」?
「重组」是一个明确定义的分析纯度级别,适用于需要特定验证属性的工作流程。它规定了最低含量百分比、对常见杂质(水分、重金属、灼烧残渣)的受控限值,以及批间一致性。「重组」是几个纯度级别之一——请根据方法的灵敏度和监管要求进行选择。
本产品应如何储存?
请于?20 °C条件下保存。避免反复冻融。建议按单次用量分装保存。
什么是「BioReagent」?
「BioReagent」表示该产品经过加工和检测,适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性,以及在相关情况下的生物活性验证。
本产品如何运输?
本产品采用保温箱配冰袋运输。收货后请立即拆包,并按上述储存条件保存。
本产品的 CAS 号、分子式和分子量是多少?
本产品的 CAS 号为 37340-58-2。
如何获取批次专用COA?
每个订单都会随附分析证书(COA),您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA,请联系您的客户代表,或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。