本试剂盒采用独特的缓冲液系统，可以将土壤或粪便样本中的多种抑制物尽可能的去除，同时提供的研磨珠可有效破碎样本中的各种复杂成分，保证从土壤或粪便中提取基因组 DNA的完整性。使用本试剂盒回收的 DNA 杂质少，完整性好，可直接用于 PCR、酶切等分子生物学下游实验。
Magnetic 纯化系统以超顺磁性的纳米磁性粒子为基质，这种磁性粒子在高浓度离液剂的条件下可通过氢键和静电特异的吸附核酸，而蛋白质或其它非特异吸附的少量杂质经洗涤被去 除，最后用低盐缓冲液或 RNase-Free ddH2O 洗脱核酸。纯化的核酸可适用于各种常规操作，包括 PCR 和 qPCR 等各种下游实验。
产品组分表：
| D1372280 | Component | 50 T | Storage | | D1372280A | Buffer MS1 | 60 ml | RT | | D1372280B | Buffer MS2 | 15 ml | RT | | D1372280C | Buffer MS3 | 15 ml | RT | | D1372280D | Buffer MLT | 60 ml | RT | | D1372280E | Buffer DW1P | 40 ml | RT | | D1372280F | Buffer MWP | 65 ml | RT | | D1372280G | Buffer EB | 15 ml | RT | | D1372280H | 研磨珠 | 15 g | RT | | D1372280I | 磁珠X | 2.2 ml | RT |
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产品特点
适用范围广：适用于从各种固态或液态粪便样本中提取基因组，同时适用于土壤样本的提取。
操作便捷：能够集中在相对较短时间内完成实验操作。
高纯更高：结合 Magnetic 纯化系统，提取的 DNA 纯度高，可直接用于下游实验。
储存条件
试剂盒置于室温干燥条件下可保存15个月。
注意事项
1. 新采取的样本会得到更高的得率，不同样本在采样前应先查阅相应的最佳保存条件。
2. 在需要吸取上清液的步骤中应避免吸到沉淀，否则会影响产物纯度。
3. 过量的 DNA 可能抑制下游 PCR 反应，遇到这种情况建议将 DNA 模板进行稀释后使用。
4. 使用前检查 Buffer MS2 是否有沉淀，若有沉淀，请在 37℃加热至完全溶解后使用。
5. 粪便样本中可能有 RNA 残留，如果需要去除 RNA，需另购 RNase A 溶液。
操作步骤
一．样本预处理
1. 研磨管制备：在2 ml离心管中加入0.25 g研磨珠。
2. 向研磨管中加入0.25-0.5 g土壤或粪便样本 (如果是液态粪便样本则转移200 µl至离心管中)，加入800 µl Buffer MS1和200 µl Buffer MS2 (干粪便可按1.5-2倍的比例酌情加入MS1和MS2。粪便样本可能有RNA残留，如需去除，可加入10 µl RNase A (10 mg/ml) (货号：R665518 ，自备))，短暂涡旋振荡混合。
3. 将研磨管固定在装有2 ml适配器的振荡研磨装置中，并根据您的设备使用优化的研磨条件进行处理 (参见附录)。
4. 将研磨管放于70℃、1200 rpm的恒温混匀仪上振荡混匀15 min。
5. 13,000 rpm离心2 min，转移上清液至新的2 ml离心管。
6. 加入200 µl Buffer MS3混匀，涡旋振荡5 sec，4℃放置10 min。
7. 13,000 rpm离心2 min。
二．手动操作
1. 转移700 μl (不足700 μl转移全部上清即可) 上清液到2 ml离心管中，然后加入1 ml Buffer MLT和40 µl磁珠XT，涡旋振荡混匀5 sec后将离心管放于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上振荡混匀5 min或将离心管连续颠倒混匀5 min。
注意：转移上清时不要移走沉淀，否则可能降低DNA纯度。
2. 将离心管放置于磁力架上静置1 min，待磁珠完全吸附后，彻底弃去溶液 (保持离心管固定于磁力架上)。
3. 将离心管从磁力架上取下，加入600 μl Buffer DW1P，涡旋振荡5 sec后放入25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上振荡混匀5 min (振荡过程中确保磁珠处于混匀状态)。之后将离心管放于磁力架上静置1 min，待磁珠完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后彻底弃去溶液 (保持离心管固定于磁力架上)。
4. 将离心管从磁力架上取下，加入600 μl Buffer MWP，涡旋振荡5 sec后放入25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上振荡混匀3 min (振荡过程中确保磁珠处于混匀状态)。之后将离心管放于磁力架上静置1 min，待磁珠完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后彻底弃去溶液 (保持离心管固定于磁力架上)。
5. 重复步骤4。
6. 保持离心管固定于磁力架上，用移液器进一步去除离心管管底和管盖上的溶液，之后室温放置5-10 min，使乙醇挥发干净 (肉眼观察磁珠表面变成哑光且磁珠无干裂)。
7. 将离心管从磁力架上取下，加入50-100 μl Buffer EB。涡旋振荡使磁珠完全悬浮于洗脱液中后将其放于56℃、1600 rpm的恒温混匀仪上振荡洗脱5 min，或将离心管放于56℃水浴锅中孵育5 min，期间每隔3 min涡旋振荡10 sec。
8. 将离心管放于磁力架上静置2 min，待磁珠完全吸附于离心管侧壁后用移液器将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。
ZJ25F0825787
危险品化学品经营许可证（带存储）