磁珠法植物基因组 DNA 提取试剂盒为植物样品的 DNA 快速制备提供了一个简单快速的解决方案。试剂盒基于超顺磁性的磁性粒子纯化技术，提取过程中无需使用有毒的酚氯仿抽提，也无需进行耗时的醇类沉淀，整个提取过程只需 40 分钟左右。该试剂盒可整合磁棒法或移液法自动核酸提取仪进行高通量提取实验，也可使用磁力分离架进行手工操作。
Magnetic 纯化系统以超顺磁性的纳米磁性粒子为基质，这种磁性粒子在高浓度离液剂的 条件下可通过氢键和静电特异的吸附核酸，而蛋白质或其它非特异吸附的少量杂质经洗涤被去除，最后用低盐缓冲液或 RNase Free ddH2O 洗脱核酸。纯化的核酸可适用于各种常规操作，包括 PCR、荧光定量 PCR 和病毒检测等各种下游实验。
产品组分表：
| D1372310 | Component | 50 T | Storage | | D1372310A | Buffer MLP1 | 30 ml | RT | | D1372310B | Buffer MPN | 30 ml | RT | | D1372310C | Buffer RW1P | 35 ml | RT | | D1372310D | Buffer MWP | 65 ml | RT | | D1372310E | Buffer EB | 15 ml | RT | | D1372310F | 磁珠XT | 2.2 ml | RT | | D1372310G | RNase A (10mg/ml) | 300 µl | RT |
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储存条件
试剂盒中所有组分可在室温干燥保存15个月。Buffer MLP1在低温下可能会有沉淀析出，可在37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。
提取得率
植物材料 | 提取量 | 平均 DNA 产量 | OD260/OD280 | 小麦 | 100 mg | 18-25 µg | 1.7-1.9 | 松树 | 100 mg | 25-30 µg | 1.7-1.9 | 马铃薯 | 100 mg | 4-6 µg | 1.7-1.9 | 番茄 | 100 mg | 10-15 µg | 1.7-1.9 | 烟草 | 100 mg | 10-15 µg | 1.7-1.9 | 水稻 | 100 mg | 10-25 µg | 1.7-1.9 | 大豆 | 100 mg | 10-25 µg | 1.7-1.9 | 玉米 | 100 mg | 20-30 µg | 1.7-1.9 | 棉花 | 100 mg | 10-25 µg | 1.7-1.9 |
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操作步骤
1. 植物材料破碎
1) 前处理方案1：向2 ml离心管中加入1颗钢珠，50-100 mg新鲜植物材料或20 mg干燥植物材料，液氮预冷后40 Hz，30 sec充分研磨成粉末，加入400 µl Buffer MLP1和5 µl RNase A (10 mg/ml)，迅速颠倒混匀后，瞬时离心，70℃金属或水浴10 min，间隔5 min取出手动混匀一次。
2) 前处理方案2：称取经液氮充分研磨好的新鲜植物材料粉末约50-100 mg或干燥植物材料粉末约15-20 mg，迅速转移到预先装有400 µl Buffer MLP1和5 µl RNase A (10 mg/ml) 的2 ml离心管中，迅速颠倒混匀后，瞬时离心，70℃金属或水浴10 min，间隔5 min取出手动混匀一次。
2. 14,000 rpm 离心4 min，转移300 µl上清至新的1.5 ml离心管中。
3. 加入550 µl Buffer MPN和40 µl磁珠XT，涡旋振荡混匀5 sec后将离心管放于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上振荡混匀5 min或将离心管连续颠倒混匀5 min。
4. 将离心管放置于磁力架上静置1 min，待磁珠完全吸附后，彻底弃去溶液 (保持离心管固定于磁力架上)。
5. 将离心管从磁力架上取下，加入600 μl Buffer RW1P后涡旋点震1 min或涡旋振荡5 sec后放入25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上振荡混匀2 min (振荡过程中确保磁珠处于混匀状态)。之后将离心管放于磁力架上静置1 min，待磁珠完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后彻底弃去溶液 (保持离心管固定于磁力架上)。
6. 将离心管从磁力架上取下，加入600 μl Buffer MWP后涡旋点震1 min或涡旋振荡5 sec后放入25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上振荡混匀2 min (振荡过程中确保磁珠处于混匀状态)。之后将离心管放于磁力架上静置1 min，待磁珠完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后彻底弃去溶液 (保持离心管固定于磁力架上)。
7. 重复步骤6。
8. 保持离心管固定于磁力架上，用移液器进一步去除离心管管底和管盖上的溶液，之后室温放置3-5 min，使乙醇挥发干净。
9. 将离心管从磁力架上取下，加入50-100 μl Buffer EB。涡旋振荡使磁珠完全悬浮于洗脱液中后将其放于65℃、1600 rpm的恒温混匀仪上振荡洗脱5 min。
10. 将离心管转移至磁力架上吸附2 min，待磁珠完全吸附后，小心将核酸溶液转移至一个新离心管 (自备) 中，并于适当条件保存。
ZJ25F0825614
危险品化学品经营许可证（带存储）