Anti-Flag 纳米抗体磁珠

货号: F1373479
有货
级别和纯度: BioReagent ? 生物试剂级(BioReagent)—— 经测试适用于生命科学和分子生物学。适用于需要生物相容性的细胞培养、检测和生化工作。 Magnetic Bead Content: ≥10 mg/mL; Bead Diameter: 2 μm
别名
DYKDDDDK纳米抗体磁珠 | Anti-Flag 磁珠
储存条件
2-8°C储存,禁止冷冻
运输条件
低温运输,禁止冷冻
应用
ChIP, Co-IP, IP, RIP
★
规格
库存
价格
数量
0.1ml
F1373479-0.1ml
现货 Stock Image
¥399.90
0.5ml
F1373479-0.5ml
现货 Stock Image
¥1,199.90
1ml
F1373479-1ml
期货 Stock Image
¥1,999.90
5ml
F1373479-5ml
期货 Stock Image
¥7,999.90
请输入您要添加的产品数量
🧪
为什么选择此级别

BioReagent 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

🌡

储存与运输

2-8°C储存,禁止冷冻。低温运输,禁止冷冻 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

📋

质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

📚

文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

储存缓冲液:20 mM PBS, 5% BSA

  Flag纳米抗体磁珠偶联了经过严格筛选、优化并重组表达的Flag纳米抗体,可用于捕获哺乳动物、植物、细菌、酵母、昆虫等多种生物细胞、组织提取物中的Flag标签(DYKDDDDK)融合蛋白及其相互作用蛋白。
  实验前先将Flag标签与目标蛋白在细胞或组织中融合表达;之后将Flag纳米抗体磁珠加入样本裂解液中,Flag纳米抗体与目标融合蛋白及其结合蛋白形成复合体;去除未结合的蛋白后,可以采用多种方法洗脱蛋白质,并且IP洗脱液中不会有抗体轻、重链污染。
产品特性: 

磁珠直径
2 µm
蛋白结合量
≥1.5 mg 蛋白/mL磁珠
反应性
可特异性结合1×或3×Flag标签(DYKDDDDK),对融合蛋白N端、C端或中间的Flag标签均可以识别
应用
免疫沉淀(IP)、免疫共沉淀(Co-IP)、染色质免疫沉淀(CHIP)、RNA 结合蛋白免疫沉淀(RIP)
储存缓冲液
20 mM PBS, 5% BSA
储存条件
4℃. Do not freeze. 有效期1年

产品优势:
1、纳米抗体,无轻重链污染。IP复合物无论采用非变性洗脱还是变性洗脱均不会出现抗体的轻、重链污染问题。
2、亲和力强。低nM级别亲和力,轻松应对低拷贝基因,或难转染细胞系。
3、结合量高。采用定向偶联技术每10 μL抗体磁珠可结合约15 μg重组蛋白。
4、特异性强。抗体磁珠通过了10株以上的空白细胞系检测不易产生非特异吸附。
5、兼容性好。无论标签在诱饵蛋白的N端或C端都可识别。
6、稳定性好。通过了40℃高温测试轻松应对物流失温,实验后忘记放冰箱等情况。
使用说明:
一、所需主要仪器
磁力架、混匀仪、低温离心机、超声破碎仪。
二、建议的缓冲液配方 

缓冲液
配方
裂解缓冲液
10 mM Tris-HCl pH 7.5, 150 mM NaCl, 0.5 mM EDTA, 0.5 % NP-40(在4°C下调整pH)
漂洗缓冲液
10 mM Tris-HCl pH 7.5, 150 mM NaCl, 0.5 mM EDTA, 0.05 % NP-40(在4°C下调整pH)
洗脱缓冲液
3×Flag多肽用PBS溶解成400 ng/µL
2×SDS-PAGE上样缓冲液
125 mM Tris-HCl pH 6.8, 4% SDS, 20%甘油, 0.004%溴酚蓝

三、注意事项
1、请勿干燥、冷冻或剧烈涡旋磁珠,禁止长时间置于磁场,可能会引起磁珠聚团,降低结合活性。
2、为保证磁珠均匀分布,请通过反复颠倒、轻微涡旋彻底混匀瓶中磁珠。
3、请勿使用PBS漂洗磁珠,否则会导致磁珠无法被磁力架吸附。
4、实验前应在裂解缓冲液和漂洗缓冲液中加入足量的蛋白酶抑制剂,RIP实验还应添加足量的RNase抑制剂,混合均匀,冰上保存,现配现用。
5、IP实验前,应先确认样本裂解液(input)中诱饵蛋白的表达水平。
6、IP实验应设置阴性对照组,通常采用表达Flag标签空载体的样本作为对照。
7、如果使用建议的缓冲体系不能获得很好的实验结果,可自行筛选、配制缓冲液进行实验。
8、具体样品量和孵育时间依赖于每个特定体系,可能需要优化才能得到最大产量。
9、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
10、本产品仅限于科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗。
四、操作步骤
1、样本裂解(参考)
(1) 按如下方法收集样本:  

样本类型
样本量/组
收集方法
动物细胞
1×10⁷个
冷PBS漂洗2~3次,每次4℃ 500g 离心5min收集沉淀,尽量吸干液体
动物组织
100~200 mg
冷PBS或生理盐水清洗干净,彻底去除血液等成分,液氮充分研磨
植物组织
200~300 mg
无菌双蒸水清洗干净,液氮充分研磨
革兰氏阴性细菌
50μL 菌体沉淀
冷PBS漂洗2~3次,每次4℃ 5000 g离心5 min收集沉淀,尽量吸干液体

(2) 将样本置于冰上,每组样本加入500 μL预冷的裂解缓冲液,吹打混匀。
(3)
a. 动物细胞:最好冰上超声至溶液基本澄清;如果无超声条件,可以置于冰上裂解30min,间隔手动混匀。
b. 动物组织、植物组织、微生物:冰上超声破碎至溶液基本澄清。
(4) 4℃ 12000 g 离心 15 min,收集上清至新的离心管中,取30 μL作为input,剩余置于冰上备用或 -80℃保存。
【注意】:
i. 当样本不能完全裂解时(溶液很浑浊),可以增加裂解缓冲液、改善裂解方法或改善超声条件继续裂解,超声条件因样本类型和超声设备而异,应提前摸索好合适的条件。
ii. 裂解缓冲液用量可随样本量增加而等比例增加,但总孵育体积最大不超过离心管体积的2/3,体积过大可以更换大规格离心管。
2、免疫共沉淀
(1) 将Flag纳米抗体磁珠上下颠倒混匀,每组取20~30 μL磁珠到新的离心管中。
(2) 加入200 µL漂洗缓冲液,颠倒混匀30次,放磁力架上静置1 min并弃上清。
(3) 重复上步操作一次。
(4) 向磁珠中加入相应组别的样本裂解液,放混匀仪上室温孵育1~2 h或4℃孵育过夜。
(5) 放磁力架上静置1 min并弃上清。
(6) 加入500 μL漂洗缓冲液,颠倒混匀30次,放磁力架上静置1 min并弃上清。
(7) 重复上步操作两次,共漂洗三次。
3、洗脱
(1) SDS-PAGE 上样缓冲液洗脱(变性洗脱法):加入50 μL 1×SDS-PAGE上样缓冲液,95℃加热5~10min。放磁力架上静置1min或5000 g离心1min,收集上清至新的离心管中。洗脱后的蛋白 -20℃保存,或直接用 于SDS-PAGE和Western Blot实验,SDS-PAGE胶条可以用于质谱检测。
(2) 3×Flag肽竞争洗脱(非变性洗脱法):加入40~50 µL Flag 多肽洗脱液 (400 ng/µL),涡旋震荡 20s,放混 匀仪上室温洗脱10~15min,涡旋震荡20s;1000 g离心20s,放磁力架上静置1min,收集上清至新的离心管中。洗脱后的蛋白 -80℃保存,或直接用于SDS-PAGE、Western Blot和质谱等实验。
【备注: Anti-Flag 纳米抗体磁珠没有抗体轻重链污染问题,建议首选变性洗脱法,洗脱效率更高。】 


规格

别名
DYKDDDDK纳米抗体磁珠 | Anti-Flag 磁珠
英文别名
DYKDDDDK tag Nanobody Magnetic Beads | Flag Magnetic Beads | Flag Nanobody Magnetic Beads | Anti-Flag Magnetic Beads
规格或纯度
BioReagent, Magnetic Bead Content: ≥10 mg/mL; Bead Diameter: 2 μm
稳定性与储存
Store at 2-8℃ long term (12 months). Do not freeze.
英文名称
Anti-Flag Nanobody Magnetic Beads
储存条件
2-8°C储存,禁止冷冻
运输条件
低温运输,禁止冷冻
产品线
生物产品
名称和识别符
分子类型
生物试剂/缓冲液
图片
Anti-Flag Nanobody Magnetic Beads (F1373479) - IP 
All lanes: Recombinant DYKDDDDK tag (Binds to Flag tag) Antibody (Ab210603) at 1/2000 dilution 
Lane 1: HEK-293 stably transfected with a P2A-bicistronic vector co-expressing Puromycin Resistance gene and an 11-tag fusion protein (Flag, HA, Myc, S-Tag, GST, His, V5, VSV-G, Strep Tag II, SUMO and EGFP) whole cell lysate. 
Lane 2: Anti-Flag Nanobody Magnetic Beads (F1373479) IP in HEK-293 stably transfected with a P2A-bicistronic vector co-expressing Puromycin Resistance gene and an 11-tag fusion protein (Flag, HA, Myc, S-Tag, GST, His, V5, VSV-G, Strep Tag II, SUMO and EGFP) whole cell lysate. 
Lane 3: Anti-Flag Nanobody Magnetic Beads (F1373479) IP in Binding Buffer. 
Secondary: Goat Anti-Mouse IgG H&L (HRP) (Ab179001) at 1/20000 dilution 
Predicted band size: 66 kDa 
Observed band size: 64,120 kDa 
Exposure time: 52.3 s 

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

全面的危险、操作、储存及法规合规文件。

下载 SDS →

✅ 分析证书 (COA)

批次质量数据。输入批号以获取对应 COA。

查询 COA →

📊 产品数据表

产品规格和应用的快速参考摘要。

查看数据表 →

🔬 规格说明书

该级别的完整质量属性和验收标准。

查看规格说明 →

高级数据

质检证书(CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
输入批号以搜索分析图谱:

通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA,每批产品都进行了严格的验证,您可放心使用!

找到6个结果

批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ25F0724603 分析证书 F1373479
ZJ25F0724605 分析证书 F1373479
ZJ26F0434927 分析证书 F1373479
ZJ26F0434926 分析证书 F1373479
ZJ26F0434316 分析证书 F1373479
ZJ25F0724604 分析证书 F1373479
技术文档和文章
纳米抗体磁珠
Nanobody Magnetic Beads
蛋白纯化中的分离介质选择:凝胶填料与磁珠的原理与应用
Selection of Separation Media in Protein Purification: Principles and Applications of Chromatography Resins and Magnetic Beads
IP/Co-IP标签免疫磁珠的原理、实验设计与应用技术指南
Principles, Experimental Design, and Application Guide for IP/Co-IP Tag Immunomagnetic Beads
预活化磁珠的偶联化学、配基固定化与靶标捕获应用
Coupling Chemistry, Ligand Immobilization, and Target Capture Applications of Pre-Activated Magnetic Beads
纳米抗体的结构特征、工程化设计及其在肿瘤诊断与治疗中的应用
Structural Features, Engineering Design, and Applications of Nanobodies in Tumor Diagnosis and Therapy
溶液计算器