产品说明:
本制品是经过大肠杆菌表达的重组蛋白,与RNase A形成 1:1 复合体,对RNase表现高度的非竞争性抑制,本品属蛋白质性质,与其它竞争性抑制剂(核酸类、无机磷酸类)不同,可以很容易地通过苯酚处理将其从反应体系中除去。
活性单位定义:
抑制 5 ng RNase A 活性的 50% 所需要的酶量定义为1个活性单位(U),RNase A 的活性通过水解Cyclic2′,3′-CMP 生成 3′-CMP 定量求得。
来源:
由 E.coli 表达,表达基因的来源为 human placenta 中编码该酶的基因。
纯度:
1) 300U的RNasin和1μg的λDNA-H ind III分解物在37℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
2) 300U的RNasin和 1μg的Closed circμlar(RFI)pBR322 DNA 在37℃下反应1小时,DNA的电
泳谱带不发生变化。
3) 100U的RNasin和 1μg的16S,23S rRNA在37℃下反应1小时,RNA的电泳谱带不发生变化。
4) SDS-PAGE:在分子量64K Da处是单一带。
应用:
1) cDNA 合成反应;
2) 多核糖体的分离(Polysome isolation);
3) 体外翻译(In vitro translation);
4) SP6 或 T7 RNA 聚合酶的体外转录;
5) 体外无细胞系统转录(In vitro transcription w ith cell-free extract)。
使用注意:
1) 抑制活性的 pH 值范围较广,在 pH 7~8 时表现最大活性;
2) 起泡或强烈搅拌(Vortex 等)会引起失活;
3) 不抑制 RNase H 活性。
使用:
cDNA 第一条链的合成。
1) 在微量离心管中配制下列反应液,全量为20μ
请参考附件,插入图片
2) 轻轻搅拌。
3) 室温下10min放置后,移入42℃温槽中。
4) 42℃保温1小时。
5) 把样品移入冰中冷却2min。
遵循以下规范生产
1. ISO 9001:2015, certified facility。
2. 《GMP 附录-细胞治疗产品》国家药品监督管理局。
3. 《人用基因治疗总论-中国药典 2020》国家药典委。
4. USP Chapter <1043>, Ancillary Materials for Cell, Gene, and Tissue-Engineered Products 用于细胞治疗,基因治疗和组织工程产品中的辅料。
5. USP Chapter <92>, Growth Factors and Cytokines Used in Cell Therapy Manufacturing 细胞治疗产品生产过程中细胞因子和生长因子。
6. Ph. Eur. General Chapter 5.2.12, Raw Materials of Biological Origin for the Production of Cell-based and Gene Therapy Medicinal Products 用于生产细胞或基因治疗药物的生物来源原料。