Clostridiopeptidase A has been used in a study to describe a quantitative method to assess small amounts of collagen based on MALDI-TOF (matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight) mass spectrometry (MS) subsequent to digestion of collagen.

This product has been used in the isolation of pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) cell lines and the tissue culture of pancreatic fibroblasts.

规格

产品名称

胶原酶来源于溶组织梭菌

别名

梭菌肽酶 A

英文别名

规格或纯度

EnzymoPure™, 生物活性, 2-5 FALGPA U/mg solid, ≥800 CDU/mg solid

生化机理

从组织中进行细胞的有效释放需要胶原酶和中性蛋白酶的作用。胶原酶被每克摩尔酶 4 克原子钙（Ca²⁺）活化。培养滤液被认为含有至少7种不同蛋白酶，分子量范围为68-130 kDa。最适pH为6.3-6.8。该酶通常用于消化组织样品中的结缔组分以释放单个细胞。胶原酶治疗可导致一些细胞死亡。通常，使用0.1至5 mg/mL的浓度用于消化。为产生令人满意的细胞解离效率并不会造成太多的细胞死亡，其反应时间从15分钟到几个小时不等。最好使用含有钙和BSA的Krebs Ringer缓冲液，Zn²⁺ 是活性必需的。每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。它被乙二醇-双（β-氨基乙基醚）-N，NN′,N′-四乙酸，β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。

生物活性

2-5 FALGPA U/mg solid, ≥800 CDU/mg solid

种属

溶组织梭菌(Clostridium histolyticum)

来源

天然

CAS编号和信息

9001-12-1

酶学委员会编号

EC 3.4.24.3

分子类型

酶

储存与运输

物理形态

固体

浓度

2-5 FALGPA U/mg solid, ≥800 CDU/mg solid

复溶

Reconstitute 0.05-0.1mg/mL Collagenase in 50mM TES buffer, containing 0.36mM CaCl2 (TESCA), pH7.4, 37℃.

储存条件

-20°C储存,避免反复冻融

运输条件

超低温运输

稳定性与储存

长期储存-20℃；复溶后建议分装，避免反复冻融。

单位定义

一个胶原蛋白消化单元（CDU）从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸，5小时，pH7.4,37℃，在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白，产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时，pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分钟水解1.0 μmole BAEE。

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