急性肝损伤动物模型的建立方法与实验评价
急性肝损伤动物模型的建立方法与实验评价
急性肝损伤动物模型用于模拟短时间内发生的肝细胞坏死、炎症反应、氧化应激、胆汁淤积或代谢紊乱,是研究肝损伤机制、评价保肝药物和筛选干预靶点的重要实验体系。常用模型包括四氯化碳、对乙酰氨基酚、刀豆蛋白A、D-氨基半乳糖/脂多糖和乙醇诱导模型,不同模型对应的损伤机制、成模时间和评价指标并不相同。
关键词:急性肝损伤;动物模型;四氯化碳;对乙酰氨基酚;刀豆蛋白A;D-GalN/LPS;酒精性肝损伤;肝功能指标
1 急性肝损伤动物模型的实验定位
1.1 模型建立目的
(1)机制研究
急性肝损伤模型可用于分析肝细胞坏死、线粒体损伤、氧化应激、炎症因子释放、免疫细胞活化和胆汁排泄异常等过程。不同诱导剂对应不同病理机制,实验设计应先明确研究重点,再选择造模方式。
(2)药效评价
保肝药物、抗氧化剂、抗炎药物、代谢调节剂和天然产物筛选常需要稳定的急性肝损伤模型。模型强度过轻不易区分药效,模型强度过重则可能造成动物死亡率升高或治疗窗口过窄,因此正式实验前应进行预实验确定剂量和取样时间。
(3)指标验证
急性肝损伤模型可用于验证ALT、AST、LDH、总胆红素、总胆汁酸、氧化应激指标、炎症因子和病理评分等检测体系。单一指标通常不能完整反映肝损伤程度,应结合血清生化、组织病理和分子机制指标综合评价。
1.2 模型选择依据
(1)损伤机制匹配
四氯化碳更适合研究自由基损伤和脂质过氧化,对乙酰氨基酚更适合模拟药物性肝损伤,刀豆蛋白A适合T细胞和免疫介导性肝损伤研究,D-GalN/LPS适合炎症因子和内毒素相关急性肝损伤研究,乙醇模型更适合酒精代谢、脂质沉积和氧化应激相关研究。
(2)观察时间窗
急性肝损伤具有明显时间依赖性。CCl4和APAP模型常在给药后数小时至24 h内出现明显血清转氨酶升高和病理损伤,ConA和D-GalN/LPS模型的炎症反应更快,乙醇模型则与给药方案、剂量和饮食状态密切相关。
(3)动物状态控制
动物品系、性别、年龄、体重、禁食状态、给药途径和环境应激均会影响模型稳定性。APAP模型尤其受禁食和肝脏谷胱甘肽储备影响,免疫性模型则对动物免疫状态和尾静脉给药稳定性更敏感。
表1 急性肝损伤动物模型选择要点
模型类型 | 代表诱导剂 | 主要机制 | 成模特点 | 适用研究方向 |
化学性肝损伤 | 自由基生成、脂质过氧化、细胞膜损伤 | 成模率高,重复性较好 | 氧化应激、肝细胞坏死、肝修复研究 | |
药物性肝损伤 | NAPQI蓄积、GSH耗竭、线粒体损伤 | 与临床药物性肝损伤相关性较强 | 药物性肝损伤、解毒代谢、线粒体损伤 | |
T细胞介导性肝损伤 | T细胞/NK细胞活化、炎症因子释放 | 炎症反应快,免疫特征明显 | 免疫性肝炎、T细胞介导炎症 | |
内毒素相关肝损伤 | 肝细胞致敏、TNF-α介导损伤 | 成模迅速,炎症因子明显升高 | 内毒素血症、炎症因子、肝衰竭机制 | |
酒精性肝损伤 | 氧化应激、脂质代谢紊乱、内毒素转位 | 与给药方案关系密切 | 酒精性肝损伤、脂肪变性、肠肝轴 |
2 化学性和药物性急性肝损伤模型
2.1 四氯化碳诱导模型
(1)损伤机制
四氯化碳(CCl4)是一类经典化学性肝损伤诱导剂,在肝细胞内经CYP酶系代谢后生成三氯甲基自由基和过氧三氯甲基自由基,这些自由基可攻击细胞膜和线粒体膜中的多不饱和脂肪酸,引发脂质过氧化、膜通透性增加、钙稳态紊乱和肝细胞坏死。
(2)建模要点
CCl4通常需用植物油或矿物油稀释后给药,可采用腹腔注射、灌胃、皮下给药等方式,不同给药途径对应的吸收速度和损伤强度不同。急性模型多采用单次给药并在短时间内取样,常用于观察血清ALT、AST升高、肝组织坏死、MDA升高、GSH下降和SOD活性改变。
(3)适用与局限
CCl4模型操作相对简单、成模率高、重复性较好,适合氧化应激、脂质过氧化、肝细胞坏死和损伤修复研究。模型强度过高时容易造成动物死亡或药效窗口变窄,超过最佳取样时间后肝脏自我修复会影响ALT、AST和病理结果判读。
2.2 对乙酰氨基酚诱导模型
(1)损伤机制
对乙酰氨基酚(APAP)过量后在肝脏中经CYP2E1等酶代谢产生高反应性中间产物NAPQI。正常情况下,少量NAPQI可被谷胱甘肽清除;当GSH耗竭后,NAPQI与线粒体蛋白结合,引起线粒体氧化应激、ATP耗竭和肝细胞坏死。
(2)建模要点
APAP模型常用于模拟药物性急性肝损伤,给药前动物禁食状态、APAP溶解条件、给药剂量、给药途径和取样时间会显著影响模型强度。APAP水溶性较差,实验中应保证配制条件稳定,并尽量现配现用,以减少沉淀和剂量偏差。
(3)适用与局限
APAP模型与临床药物性肝损伤联系较强,适合研究药物代谢、GSH耗竭、线粒体损伤、坏死性炎症和解毒干预。该模型对动物禁食、性别、品系和代谢状态较敏感,若条件控制不一致,容易出现组内差异较大。
表2 化学性和药物性急性肝损伤模型比较
模型 | 主要机制 | 常用评价指标 | 主要优势 | 主要限制 |
CCl4模型 | 自由基生成、脂质过氧化、膜损伤 | ALT、AST、MDA、SOD、GSH、肝组织坏死 | 成模率高,适合氧化应激研究 | 剂量过高易死亡,取样时间影响明显 |
APAP模型 | NAPQI蓄积、GSH耗竭、线粒体损伤 | ALT、AST、GSH、MDA、线粒体损伤、坏死面积 | 与药物性肝损伤相关性强 | 受禁食、溶解和代谢状态影响大 |
3 免疫性急性肝损伤模型
3.1 刀豆蛋白A诱导模型
(1)损伤机制
刀豆蛋白A(ConA)是一种植物凝集素,可激活T细胞、NK细胞、Kupffer细胞和多种炎症通路,诱导IFN-γ、TNF-α、IL-6等炎症因子释放,并通过免疫细胞介导的炎症反应造成肝细胞凋亡或坏死。该模型常用于研究T细胞介导性肝炎和免疫性肝损伤机制。
(2)建模要点
ConA模型通常采用静脉给药,给药后较短时间内即可出现明显炎症反应和转氨酶升高。模型稳定性受动物品系、免疫状态、给药速度、溶液状态和尾静脉注射技术影响,实验中应尽量统一操作人员和给药条件。
(3)适用与局限
ConA模型适合研究免疫细胞活化、细胞因子风暴、T细胞介导性肝炎和免疫调节药物评价。该模型对给药技术要求较高,且炎症反应进展快,取样时间选择会直接影响炎症因子、血清酶学和病理结果。
3.2 D-GalN/LPS诱导模型
(1)损伤机制
D-氨基半乳糖(D-GalN)可使肝细胞对内毒素更加敏感,脂多糖(LPS)则通过激活TLR4相关炎症通路诱导TNF-α、IL-1β、IL-6等细胞因子释放。二者联合可造成炎症因子介导的急性肝损伤,常用于模拟内毒素相关肝炎和急性肝衰竭早期过程。
(2)建模要点
D-GalN/LPS模型通常采用联合给药方式,成模速度快,炎症因子升高明显。实验中应重点控制D-GalN和LPS剂量比例、给药时间、动物状态和取样时间,并通过预实验确定既能形成稳定损伤又能保留药效评价窗口的条件。
(3)适用与局限
该模型适合研究巨噬细胞/Kupffer细胞活化、TNF-α介导损伤、炎症因子网络和抗炎保肝药物作用。模型强度过高时死亡率可能升高,炎症反应过强也可能掩盖部分干预药物的保护作用。
表3 免疫性急性肝损伤模型比较
模型 | 关键诱导环节 | 主要炎症特征 | 常用指标 | 适用方向 |
ConA模型 | T细胞/NK细胞活化 | IFN-γ、TNF-α、IL-6升高 | ALT、AST、炎症因子、肝组织炎症浸润 | T细胞介导性肝炎、免疫调节研究 |
肝细胞致敏+内毒素炎症激活 | TNF-α、IL-1β、IL-6升高 | ALT、AST、TNF-α、IL-6、凋亡/坏死指标 | 内毒素相关肝损伤、炎症因子和急性肝衰竭研究 |
4 酒精性急性肝损伤模型
4.1 乙醇诱导模型
(1)损伤机制
乙醇主要在肝脏代谢,经乙醇脱氢酶、乙醛脱氢酶和微粒体乙醇氧化系统等途径生成乙醛和活性氧,导致氧化应激、脂质代谢紊乱、甘油三酯积累和炎症反应。乙醇还可增加肠道通透性,使内毒素进入门静脉系统并激活Kupffer细胞,加重肝脏炎症损伤。
(2)建模要点
乙醇急性肝损伤可通过灌胃、饮食干预或注射等方式建立,具体方案需根据是否关注急性中毒、脂肪变性、炎症反应或肠肝轴改变进行选择。检测指标可包括ALT、AST、肝组织TG、MDA、GSH、炎症因子和肝组织脂肪变性评分。
(3)适用与局限
乙醇模型适合研究酒精代谢、氧化应激、脂肪变性、炎症损伤和肠肝轴调控。模型结果受饮食、禁食、乙醇耐受性、给药方式和取样时间影响明显,若研究目标是慢性酒精性肝病,应采用更长周期的饮食或慢性给药模型。
4.2 酒精性模型与其他模型的区别
(1)损伤特征
CCl4和APAP模型以毒性代谢物、自由基或线粒体损伤为主,ConA和D-GalN/LPS模型以免疫炎症反应为主,乙醇模型则同时涉及乙醇代谢、氧化应激、脂质沉积和肠源性内毒素刺激。实验选择时应根据研究问题匹配模型,而不应仅依据成模速度选择。
(2)评价重点
乙醇模型除ALT、AST和病理损伤外,更应关注肝脏脂质沉积、TG含量、氧化应激、炎症因子和肠屏障相关指标。若只检测转氨酶,可能低估乙醇模型中脂肪变性和代谢紊乱的研究价值。
表4 常用急性肝损伤模型的应用比较
模型类型 | 代表诱导剂 | 主要病理特征 | 推荐取样重点 | 更适合回答的问题 |
化学性肝损伤 | 中央静脉周围坏死、脂质过氧化 | ALT、AST、MDA、SOD、GSH、病理坏死 | 抗氧化和膜损伤保护是否有效 | |
药物性肝损伤 | 线粒体损伤、GSH耗竭、肝细胞坏死 | ALT、AST、GSH、线粒体损伤、坏死面积 | 药物毒性和解毒代谢是否被调节 | |
T细胞介导性肝损伤 | 炎症浸润、T细胞介导坏死 | IFN-γ、TNF-α、IL-6、免疫细胞浸润 | 免疫炎症反应是否被抑制 | |
内毒素相关肝损伤 | 炎症因子升高、凋亡/坏死 | TNF-α、IL-1β、IL-6、凋亡指标 | 内毒素炎症和细胞因子通路是否被干预 | |
酒精性肝损伤 | 脂肪变性、氧化应激、炎症反应 | TG、MDA、GSH、ALT、AST、脂肪变性评分 | 酒精代谢、脂质沉积和肠肝轴是否被调节 |
5 模型评价指标与质量控制
5.1 血清生化指标
(1)转氨酶指标
ALT和AST是评价急性肝细胞损伤最常用的血清指标。ALT更偏向肝细胞损伤,AST还受线粒体损伤、肌肉来源和全身状态影响。急性损伤模型中,ALT和AST升高通常可提示肝细胞膜完整性受损,但需要结合病理和时间窗判断。
(2)胆红素和胆汁酸指标
总胆红素、直接胆红素和总胆汁酸可用于评价肝胆排泄和胆汁淤积相关变化。并非所有急性肝损伤模型都会明显改变胆红素或胆汁酸,因此是否纳入这些指标应根据模型机制和研究目标决定。
5.2 组织病理和细胞死亡指标
(1)病理评价
HE染色可观察肝细胞肿胀、坏死、炎症浸润、脂肪变性和组织结构破坏,是急性肝损伤模型评价的重要依据。CCl4和APAP模型常关注坏死区域和肝小叶结构破坏,乙醇模型则更应关注脂肪变性和炎症改变。
(2)细胞死亡
TUNEL、cleaved caspase-3、Bax/Bcl-2和HMGB1等指标可用于区分凋亡、坏死或炎症性细胞死亡相关过程。D-GalN/LPS和ConA模型更适合结合炎症因子与凋亡指标,APAP模型则更应关注坏死和线粒体损伤相关指标。
5.3 氧化应激和炎症指标
(1)氧化应激
MDA、GSH、T-GSH、GSH-Px、SOD和ROS水平可用于评价氧化损伤和抗氧化防御能力。CCl4、APAP和乙醇模型均可纳入氧化应激指标,但不同模型中氧化应激出现的时间和程度不同,应与取样时间匹配。
(2)炎症因子
TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-γ、MCP-1等可用于评价炎症反应。ConA模型更关注T细胞/NK细胞相关炎症,D-GalN/LPS模型更关注内毒素诱导的TNF-α通路,乙醇模型则可结合肠源性内毒素和Kupffer细胞活化分析。
表5 急性肝损伤模型常用评价指标
指标类别 | 代表指标 | 主要意义 | 适用模型 |
肝功能损伤 | ALT、AST、LDH | 肝细胞膜损伤和酶释放 | 所有急性肝损伤模型 |
胆汁排泄 | TBIL、DBIL、TBA | 胆汁淤积和胆道排泄状态 | 胆汁淤积相关模型、重度肝损伤模型 |
氧化应激 | MDA、GSH、T-GSH、GSH-Px、SOD | 脂质过氧化和抗氧化能力 | CCl4、APAP、乙醇模型 |
炎症因子 | TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-γ | 炎症反应和免疫激活 | ConA、D-GalN/LPS、乙醇模型 |
内毒素反应 | LPS、LBP | 内毒素暴露和肠源性炎症反应 | D-GalN/LPS、乙醇模型 |
组织病理 | HE染色、坏死面积、炎症评分、脂肪变性评分 | 组织结构和病理损伤程度 | 所有急性肝损伤模型 |
细胞死亡 | TUNEL、cleaved caspase-3、Bax/Bcl-2、HMGB1 | 凋亡、坏死或炎症性损伤 | APAP、ConA、D-GalN/LPS模型 |
6 相关试剂与材料选型
表6 急性肝损伤动物模型建立相关试剂
货号 | 名称 | 级别和纯度 | 模型类型 | 应用定位 |
四氯化碳 | 分析标准品, ≥99.9% | CCl4化学性肝损伤模型 | 用于建立四氯化碳诱导的急性肝损伤模型,适合氧化应激、脂质过氧化和肝细胞坏死研究 | |
对乙酰氨基苯酚 | AR, ≥99% | APAP药物性肝损伤模型 | 用于建立对乙酰氨基酚诱导的药物性急性肝损伤模型 | |
对乙酰氨基苯酚 | 分析标准品, ≥99.5% | APAP药物性肝损伤模型/标准品 | 适合APAP模型相关方法学验证、剂量控制和分析标准使用 | |
对乙酰氨基苯酚 | ≥98% | APAP药物性肝损伤模型 | 用于药物性肝损伤模型建立和APAP相关实验体系 | |
伴刀豆球蛋白A 来源于洋刀豆 (刀豆) | BioReagent, 无菌 | ConA免疫性肝损伤模型 | 用于建立ConA诱导的T细胞介导性急性肝损伤模型 | |
伴刀豆球蛋白A 来源于洋刀豆 (刀豆) | BioReagent, 无菌 | ConA免疫性肝损伤模型 | 适合免疫性肝损伤、T细胞活化和炎症因子释放研究 | |
刀豆凝集素A(Con A) | ≥90% | ConA免疫性肝损伤模型 | 用于ConA诱导急性免疫性肝损伤相关实验 | |
D-半乳糖胺盐酸盐 | ≥99% | D-GalN/LPS免疫炎症性肝损伤模型 | 与LPS联合用于建立D-GalN/LPS诱导的急性肝损伤模型 | |
D-半乳糖胺盐酸盐 | 用于细胞培养, ≥99% | D-GalN/LPS免疫炎症性肝损伤模型 | 用于D-GalN相关细胞或动物实验体系 | |
脂多糖 (LPS) 溶液 (500X) | 无菌过滤,BioReagent,500X (1mg/mL) | D-GalN/LPS模型/内毒素刺激 | 用于LPS相关炎症刺激、D-GalN/LPS模型或体外炎症验证 | |
脂多糖 来源于大肠杆菌 0111:B4 | purified by phenol extraction | D-GalN/LPS模型/内毒素刺激 | 用于内毒素相关急性肝损伤和炎症因子释放研究 | |
脂多糖(LPS) | 来源于大肠杆菌 055:B5, purified by trichloroacetic acid extraction | D-GalN/LPS模型/内毒素刺激 | 适合LPS诱导炎症反应和D-GalN联合造模 | |
脂多糖 来源于大肠杆菌 0127:B8 | γ-irradiated, BioReagent, 用于细胞培养 | LPS炎症刺激 | 用于细胞培养体系中的内毒素炎症刺激实验 | |
脂多糖 来源于大肠杆菌 026:B6 | γ-irradiated, BioReagent, 用于细胞培养 | LPS炎症刺激 | 用于体外Kupffer细胞、巨噬细胞或炎症通路研究 | |
乙醇 | Moligand™, 无水级, ≥99.5%, H2O≤0.005% | 乙醇诱导酒精性肝损伤模型 | 用于急性乙醇性肝损伤、氧化应激和脂质代谢紊乱模型 | |
乙醇 | Moligand™, 分析标准品, ≥99.9%(GC) | 乙醇模型/标准品 | 用于乙醇相关方法学验证和定量分析 | |
乙醇(95%) | AR, ≥95% | 乙醇诱导模型/实验配制 | 可用于乙醇相关实验体系配制和模型条件摸索 |
表7 急性肝损伤肝功能与胆汁淤积评价产品
货号 | 名称 | 级别和纯度 | 指标类别 | 应用定位 |
谷丙转氨酶(ALT/GPT)活性检测试剂盒(二硝基苯肼, 微量法) | BioReagent | 肝功能损伤 | 用于血清、血浆或组织样本ALT活性检测,是急性肝细胞损伤评价的核心指标 | |
谷草转氨酶(AST/GOT)活性检测试剂盒(二硝基苯肼, 微量法) | BioReagent | 肝功能损伤 | 用于AST活性检测,适合与ALT联合评价肝细胞损伤程度 | |
小鼠天门冬氨酸氨基转移酶(AST)酶联免疫吸附测定试剂盒 | BioReagent | 小鼠AST检测 | 用于小鼠急性肝损伤模型中AST相关检测 | |
人谷草转氨酶/天门冬氨酸氨基转移酶2(AST2/GOT2)酶联免疫吸附测定试剂盒 | BioReagent | AST2/GOT2检测 | 更适合人源样本或机制研究,不作为小鼠急性肝损伤模型的首选肝功能指标 | |
乳酸脱氢酶 (LDH) 细胞毒性检测试剂盒 (WST-8, 微量法) | BioReagent | 细胞损伤/细胞毒性 | 用于肝细胞损伤、细胞毒性和体外药物干预实验评价 | |
乳酸脱氢酶 (LDH) 细胞毒性检测试剂盒 (二硝基苯肼, 微量法) | BioReagent | 细胞损伤/细胞毒性 | 用于LDH释放和细胞膜完整性损伤评价 | |
乳酸脱氢酶(LDH)活性检测试剂盒(LD-L, 比色法) | BioReagent | LDH活性 | 用于血清、组织或细胞样本LDH活性检测 | |
乳酸脱氢酶(LDH)活性检测试剂盒(LD-P, 紫外比色法) | BioReagent | LDH活性 | 用于紫外比色体系下LDH活性检测 | |
乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试剂盒(二硝基苯肼, 比色法) | BioReagent | 细胞毒性 | 用于肝细胞毒性、药物干预和细胞损伤评价 | |
总胆红素(TBIL)含量检测试剂盒(微量法) | BioReagent | 胆红素代谢/胆汁淤积 | 用于总胆红素检测,适合重度急性肝损伤和胆汁排泄异常评价 | |
直接胆红素(DBIL)含量检测试剂盒(微量法) | BioReagent | 直接胆红素/胆汁排泄 | 用于直接胆红素检测,适合胆汁淤积、胆道排泄异常和重度肝损伤评价 | |
总胆汁酸(TBA)含量检测试剂盒(微量法) | BioReagent | 胆汁酸代谢/胆汁淤积 | 用于总胆汁酸检测,适合肝胆排泄异常、胆汁淤积和肝损伤相关胆汁酸代谢评价 | |
尿胆红素定性检测试剂盒(Harrison法) | BioReagent | 尿胆红素 | 用于胆色素代谢相关尿液辅助检测,适合肝胆排泄异常相关扩展评价 |
表8 急性肝损伤氧化应激、炎症和病理评价产品
货号 | 名称 | 级别和纯度 | 指标类别 | 应用定位 |
丙二醛 (MDA) 含量检测试剂盒(TBA, 比色法) | BioReagent | 脂质过氧化 | 用于CCl4、APAP、乙醇等模型中肝组织MDA含量检测 | |
丙二醛 (MDA) 含量检测试剂盒(TBA, 荧光法) | BioReagent | 脂质过氧化 | 用于低含量样本或高灵敏度MDA检测 | |
脂质氧化(MDA)检测试剂盒 | 足以进行100次比色或荧光测试 | 脂质过氧化 | 用于脂质氧化水平检测,适合氧化应激损伤评价 | |
大鼠丙二醛(MDA)酶联免疫吸附测定试剂盒 | BioReagent | 大鼠MDA检测 | 用于大鼠急性肝损伤模型MDA相关检测 | |
总谷胱甘肽(T-GSH)含量检测试剂盒(DTNB, 微量法) | BioReagent | 谷胱甘肽系统 | 用于总谷胱甘肽检测,适合APAP、CCl4和乙醇模型抗氧化能力评价 | |
总谷胱甘肽(T-GSH)含量检测试剂盒(DTNB, 比色法) | BioReagent | 谷胱甘肽系统 | 用于比色法总谷胱甘肽含量检测 | |
还原型谷胱甘肽 (GSH) 含量检测试剂盒 (DTNB, 微量法) | BioReagent | GSH含量 | 用于GSH耗竭和抗氧化能力评价,尤其适合APAP模型 | |
还原型谷胱甘肽 (GSH) 含量检测试剂盒 (DTNB, 比色法) | BioReagent | GSH含量 | 用于比色法GSH含量检测 | |
谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px) 活性检测试剂盒(DTNB, 微量法) | BioReagent | 抗氧化酶活性 | 用于GSH-Px活性检测,适合氧化应激和抗氧化防御评价 | |
谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px) 活性检测试剂盒(DTNB, 比色法) | BioReagent | 抗氧化酶活性 | 用于比色法GSH-Px活性检测 | |
总超氧化物歧化酶 (SOD) 检测试剂盒(NBT 核黄素微板法) | BioReagent | SOD活性 | 用于微板法总SOD检测,适合肝组织抗氧化能力评价 | |
总超氧化物歧化酶 (SOD) 检测试剂盒(NBT 核黄素比色法) | BioReagent | SOD活性 | 用于比色法总SOD检测 | |
总超氧化物歧化酶 (SOD) 活性检测试剂盒 (WST-8, 微量法) | BioReagent | SOD活性 | 用于WST-8体系总SOD活性检测 | |
总超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒(邻苯三酚, 紫外比色法) | BioReagent | SOD活性 | 用于紫外比色体系SOD活性检测 | |
大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)酶联免疫吸附测定试剂盒 | BioReagent | 炎症因子 | 用于大鼠急性肝损伤模型TNF-α检测 | |
小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)酶联免疫吸附测定试剂盒 | BioReagent | 炎症因子 | 用于小鼠急性肝损伤模型TNF-α检测 | |
小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)酶联免疫吸附测定试剂盒 | BioReagent | 炎症因子 | 用于小鼠炎症性肝损伤TNF-α检测 | |
大鼠白细胞介素6(IL-6)酶联免疫吸附测定试剂盒 | BioReagent | 炎症因子 | 用于大鼠急性肝损伤模型IL-6检测 | |
小鼠白细胞介素6(IL-6)酶联免疫吸附测定试剂盒 | BioReagent | 炎症因子 | 用于小鼠急性肝损伤模型IL-6检测 | |
小鼠白细胞介素6(IL-6)酶联免疫吸附测定试剂盒 | BioReagent | 炎症因子 | 用于小鼠炎症性肝损伤IL-6检测 | |
大鼠脂多糖(LPS)酶联免疫吸附测定试剂盒 | BioReagent | 内毒素相关指标 | 用于大鼠D-GalN/LPS或乙醇相关内毒素反应评价 | |
小鼠脂多糖(LPS)酶联免疫吸附测定试剂盒 | BioReagent | 内毒素相关指标 | 用于小鼠LPS相关炎症反应和内毒素水平检测 | |
大鼠脂多糖/内毒素结合蛋白(LBP)酶联免疫吸附测定试剂盒 | BioReagent | 内毒素结合蛋白 | 用于大鼠内毒素反应、肠源性LPS转位和炎症机制研究 | |
小鼠脂多糖/内毒素结合蛋白(LBP)酶联免疫吸附测定试剂盒 | BioReagent | 内毒素结合蛋白 | 用于小鼠内毒素反应和D-GalN/LPS模型机制研究 | |
改良苏木素-伊红(HE)染色试剂盒 | BioReagent,用于细胞培养,用于显微镜 | 组织病理 | 用于肝组织坏死、炎症浸润和组织结构观察 | |
苏木素-伊红 (HE)高清恒定染色试剂盒 (高清恒染) | BioReagent,用于显微镜,生物染色剂 | 组织病理 | 用于肝组织HE染色和病理评价 | |
苏木素伊红 (HE)染色试剂盒 (含分化液) | BioReagent,用于显微镜,生物染色剂 | 组织病理 | 用于常规HE染色,适合急性肝损伤病理分析 | |
苏木素伊红 (HE)染色试剂盒 (含分化液和返蓝液) | BioReagent,用于显微镜,生物染色剂 | 组织病理 | 用于肝组织HE染色和病理形态学观察 | |
胆色素染色液 (改良Fouchet法) | BioReagent, 生物染色剂, 用于显微镜 | 胆色素染色 | 用于胆色素沉积、胆汁淤积或胆红素相关组织学观察 | |
Biotin TUNEL细胞凋亡试剂盒 |
| 细胞死亡 | 用于肝组织或细胞凋亡检测 | |
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法) | BioReagent,比色法,用于显微镜 | 细胞死亡 | 用于显色法TUNEL检测,适合组织切片显微镜观察 | |
aladdin®488 TUNEL 细胞凋亡试剂盒(绿色荧光) |
| 细胞死亡 | 用于荧光TUNEL检测,适合凋亡细胞定位分析 | |
aladdin®555 TUNEL 细胞凋亡试剂盒(橙红色荧光) |
| 细胞死亡 | 用于荧光TUNEL检测和多重染色搭配 | |
aladdin®594 TUNEL 细胞凋亡试剂盒(红色荧光) |
| 细胞死亡 | 用于红色荧光TUNEL检测 | |
aladdin®640 TUNEL 细胞凋亡试剂盒(远红荧光) |
| 细胞死亡 | 用于远红荧光TUNEL检测,适合多色免疫荧光实验 |
7 常见问题
7.1 急性肝损伤模型应该选择CCl4还是APAP?
CCl4更适合研究自由基损伤、脂质过氧化和膜结构破坏,APAP更适合研究药物性肝损伤、GSH耗竭和线粒体损伤。若实验目标是筛选抗氧化保肝药物,可优先考虑CCl4模型;若关注药物代谢毒性或解毒机制,APAP模型更匹配。
7.2 ConA模型和D-GalN/LPS模型有什么区别?
ConA模型更偏向T细胞和NK细胞介导的免疫性肝损伤,适合研究免疫性肝炎和T细胞相关炎症;D-GalN/LPS模型更偏向内毒素、巨噬细胞和TNF-α介导损伤,适合研究炎症因子网络和急性肝衰竭早期机制。
7.3 CCl4模型为什么超过一定时间后结果会下降?
急性CCl4损伤后,肝脏具有较强自我修复能力。若取样时间过晚,ALT和AST可能开始下降,组织坏死区域也可能进入修复阶段,从而影响损伤程度和药效结果判断。
CCl4适合氧化应激和膜损伤研究,APAP适合药物性肝毒性研究,ConA和D-GalN/LPS适合免疫炎症相关研究,乙醇模型适合酒精代谢、脂质沉积和肠肝轴研究。
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